Анализ транслокации t(2;5)(p23;q35) на парафиновых срезах (гистоFISH, колич.) Analysis of translocation t(2;5)(p23;q35) on paraffin slides (FISH Histology, quantitative)

Метод определения FISH – исследование интерфазных ядер опухолевого материала

Исследуемый материал опухолевая ткань, прошедшая предварительную гистологическую обработку и заключенная в парафин.

Среди группы анаплазированных крупноклеточных лимфом (Т/0-клеточных CD30+ лимфосарком) выделяют первичную анаплазированную крупноклеточную CD30+ лимфосаркому (АККЛ) с наличием маркера специфической киназы анаплазированных лимфом (anaplastic lymphoma kinase – ALK+), которая составляет примерно 50-70% от всех Т-клеточных анаплазированных крупноклеточных лимфом. ALK+ АККЛ чаще всего поражает детей и молодых людей. В патологический процесс вовлекаются периферические, медиастинальные, абдоминальные лимфатические узлы. Также возможно экстранодальное поражение костей, костного мозга, подкожной клетчатки, легких, селезенки и печени. ALK+ АККЛ прогностически благоприятна и хорошо отвечает на химио- и лучевую терапию.

Основной диагностический критерий ALK-позитивных АККЛ – транслокация t(2;5)(p23;q35) с образованием химерного гена NPM-ALK в результате слияния генов нуклеофосмина (NPM), локализованного на длинном плече 5 хромосомы (5q35) с ALK (2p23). Это ведет к активации онкогена ALK и выработке трансмембранного химерного белка р80, имеющего аномальную киназную активность, что может приводить к опухолевой трансформации.

Одним из молекулярных методов диагностики ALK+ АККЛ, позволяющих прицельно исследовать очаг поражения на наличие перестройки локуса гена ALK/2р23, является флуоресцентная in situ гибридизация (Fluorescence In Situ Hibridization, FISH), выполняемая на гистологических срезах с парафинового блока опухоли (гистоFISH). Метод позволяет выявить присутствие и точную локализацию определенной, заранее известной последовательности ДНК. Оценка связывания ДНК-пробы с хромосомным участком происходит в флюоресцентном микроскопе. Интерпретация результатов FISH - исследований производится в соответствии с Международной номенклатурой (ISCN,2015).

Методы генетической диагностики онкогематологических заболеваний

Литература

Карселадзе А.И. Архив патологии. «Реакция флюоресцентной in situ гибридизации (FISH-реакция) в диагностике онкологических заболеваний». Москва. Медицина. 2009.
Абрамов Д.С., Мякова Н.В. «ALK- позитивная анапластическая крупноклеточная лимфома: диагностика, клинические проявления, лечение». Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии том 14. номер 2. Год 2015 .
Е.В. Чернышова, Д.С. Абрамов, Д.М. Коновалов, С.С. Ларин, Н.В. Мякова «Молекулярно-биологические характеристики ALK – позитивной анапластической крупноклеточной лимфомы». Онкогематология 4’2016 том 11.
«Клинические рекомендации по диагностике и лечению нодальных Т-клеточных лимфом». Коллектив авторов под руководством академика В.Г. Савченко, профессора И.В. Поддубной, 2014 г.

Используемая FISH-проба	Аберрация	% (кол-во) интерфазных ядер с аберрацией	Общее кол-во ядер
ALK Break Apart Probe Kit (Vysis)	Перестройка локуса гена ALK/2p23	50,0 (100)	200

Используемая FISH-проба	Аберрация	% (кол-во) интерфазных ядер с аберрацией	Общее кол-во ядер
ALK Break Apart Probe Kit (Vysis)	Перестройка локуса гена ALK/2p23	0	200

Литература

Цена исследования «Анализ транслокации t(2;5)(p23;q35) на парафиновых срезах (гистоFISH, колич.) Analysis of translocation t(2;5)(p23;q35) on paraffin slides (FISH Histology, quantitative)» в г. Алексин - 15395 руб.