Исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах методом TUNEL

Синонимы: Анализ эякулята на повреждения ДНК в сперматозоидах.

Sperm DNA fragmentation.

Краткое описание исследования «Исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах методом TUNEL»

Анализ повреждений ДНК сперматозоидов предназначен для оценки фертильной функции и выявления причин бесплодия и спонтанных абортов. В места разрыва ДНК с помощью энзиматической реакции встраивается флуоресцирующий меченый нуклеотид. Под микроскопом подсчитывается доля флуоресцирующих сперматозоидов.

Для исследования необходимо выполнить параллельно с TUNEL светооптическое исследование эякулята (тест № 599), исследование выполняется из одного и того же образца биоматериала. Если светооптическое исследование было выполнено ранее (1-3 месяца назад), для выполнения TUNEL необходимо предоставить его результаты.

Анализ TUNEL (маркировка терминальной трансферазы dUTP Nick End) является одним из наиболее надежных и чувствительных методов оценки фрагментации (повреждения) ДНК сперматозоидов.

С какой целью выполняют исследование

Анализ повреждений ДНК сперматозоидов применяют для оценки фертильной функции и определения причин бесплодия и спонтанных абортов. Исследование также проводят перед применением методов репродуктивных технологий: инсеминации, ИКСИ (интрацитоплазматического введения сперматозоидов), ЭКО (экстракорпорального оплодотворения).

Что может повлиять на результат исследования

Нарушение правил подготовки может повлиять на результат.

Литература

1. Громенко И. Д. и др. Фрагментация ДНК сперматозоидов: связь с мужским бесплодием и методы коррекции //Патологическая физиология и экспериментальная терапия. – 2023. – Т. 67. – №. 3. – С. 142-148.
2. Клинические рекомендации. Мужское бесплодие. – 2021.
3. Олефир Ю. В. и др. Шестое руководство воз по обработке и исследованию эякулята: всё новое-это хорошо забытое старое? //Вестник урологии. – 2023. – Т. 11. – №. 1. – С. 171-176.
4. Björndahl L. et al. The sixth edition of the WHO Laboratory Manual for the Examination and Processing of Human Semen: ensuring quality and standardization in basic examination of human ejaculates //Fertility and sterility. – 2022. – Т. 117. – №. 2. – С. 246-251.
5. Chatzimeletiou K. et al. Evaluation of sperm DNA fragmentation using two different methods: TUNEL via fluorescence microscopy, and flow cytometry //Medicina. – 2023. – Т. 59. – №. 7. – С. 1313.
6. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen, Sixth Edition. – 2021.

Правила подготовки к исследованию

Перед сбором материала необходимо не менее, чем 48-часовое, и не более, чем 7-дневное, воздержание. Причем, при проведении повторных исследований желательно устанавливать один и тот же период воздержания. В течение этого промежутка времени необходимо исключить прием алкогольных напитков, лекарственных препаратов (если это не угрожает жизни и здоровью клиента), воздействие повышенной температуры (посещение бани/сауны, производственная гипертермия, лихорадочные состояния), ультразвукового излучения. Также в этот период необходимо полноценное питание. В день, предшествующий выполнению анализа, желательно исключить тяжелые физические и психологические нагрузки. Для исследования необходимо выполнить параллельно с TUNEL светооптическое исследование эякулята (тест № 599), исследование выполняется из одного и того же образца биоматериала. Если светооптическое исследование было выполнено ранее (1-3 месяца назад), для выполнения TUNEL необходимо предоставить его результаты. Перед сдачей материала следует помочиться. Эякулят собирается путем мастурбации в специальную стерильную посуду. Для получения корректных результатов исследования необходимо собрать весь полученный эякулят. Если одновременно с TUNEL заказаны другие исследования эякулята, то все исследования выполняются из одного и того же образца биоматериала. Направительный бланк: ЭМИС (Электронно-микроскопическое исследование сперматозоидов).

Инструкция по сбору биоматериала.

В каких случаях проводят анализ «Исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах методом TUNEL»: 

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: %.

Референсные значения: содержание сперматозоидов с разрывами ДНК – не более 15%.

Трактовка результатов исследования «Исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах методом TUNEL»

Причины появления патологических изменений:

• врожденные (генетически обусловленные) нарушения спермиогенеза (дефицит протаминов);
• воздействие вредных факторов (различные виды излучения, прием некоторых лекарственных средств, систематический прием алкоголя, отравление свинцом, ртутью);
• хронические воспалительные заболевания репродуктивных органов (простатит, везикулит);
• варикоцеле.

(См. схему строения сперматозоида).