Определение микросателлитной нестабильности иммуногистохимическим методом (Microsatellite instability testing (MMR/MSI), IHC method)

Синонимы: MSI-тестирование иммуногистохимическим методом исследования/MSI testing, IHC method.

Краткое описание исследования «Определение микросателлитной нестабильности иммуногистохимическим методом»

Система репарации неспаренных нуклеотидов ДНК (Mismatch Repair System — MMR) — это молекулярный механизм, цель которого заключается в исправлении неправильных замен нуклеотидов, спонтанно происходящих во время репликации ДНК. Ключевую роль в функционировании MMR играют четыре гена:

• MLH1 (mutL homologue 1);
• MSH2 (mutS homologue 2);
• MSH6 (mutS homologue 6);
• PMS2 (postmeiotic segregation increased 2).

Эти гены кодируют одноименные белки — MLH1, MSH2, MSH6, PMS2, существующие в виде гетеродимеров — MLH1-PMS2 и MSH2-MSH6. Из-за спорадических или герминальных (наследственных) мутаций в части опухолей происходит нарушение функционирования одного или нескольких из этих генов, что приводит к нарушению функционирования (дефициту) MMR — dMMR.

Цепь ДНК содержит участки, где нуклеотиды образуют повторы от 1 до 6 оснований, так называемые микросателлиты. В процессе репликации ДНК в микросателлитах в результате инсерции оснований могут происходить изменения. В норме такие мутации устраняются системой MMR. При дефиците систем репарации (dMMR) происходит накопление таких изменений в микросателлитах, что приводит к возникновению состояния генетической нестабильности — генетической гипермутабельности, или микросателлитной нестабильности (Microsatellite Instability — MSI). Таким образом, MSI является фенотипическим свидетельством того, что система репарации (MMR) не функционирует нормально.

Опухоли, характеризующиеся наличием микросателлитной нестабильности, принято обозначать как MMR-дефицитные (dMMR/MSI-H). Опухоли, не имеющие мутаций, генетически стабильные, принято обозначать как MMR-профицитные (pMMR/MSS). Любая опухоль с таким вариантом молекулярного патогенеза (микросателлитной нестабильностью (MSI)) имеет тысячи мутаций в микросателлитных повторах и других участках генома. Образование большого количества неоантигенов приводит к стереотипной реакции активации Т-лимфоцитов с последующей инфильтрацией ими опухоли. Механизмом ускользания опухоли от иммунного ответа в данном случае становится экспрессия клетками опухоли молекул контрольных точек, в том числе PD-L1, что создает возможность использования ингибиторов контрольных точек, таких как анти-PD1, для лечения таких пациентов.

Анти-PD1-препарат блокирует взаимодействие лигандов контрольных точек с родственными им рецепторами на эффекторных клетках, что обусловливает мощный противоопухолевый эффект. Таким образом, большая часть мутантных неоантигенов в MMR-дефицитных опухолях являются чувствительными к блокаде молекул контрольных точек вне зависимости от тканевого происхождения опухоли.

В настоящее время для тестирования MMR/MSI используют несколько методов:

• иммуногистохимическое исследование;
• ПЦР-исследование;
• секвенирование нового поколения (NGS).

Согласно рекомендациям ESMO 2019 г., первым методом в определении MMR/MSI является иммуногистохимия (рекомендация A, сильная степень консенсуса 8,7/10), методом второй линии для сомнительных случаев, полученных при ИГХ-тестировании и изолированном нарушении экспрессии PMS2 и MSH6, является ПЦР-тест (рекомендация B). Однако совет экспертов ESMO рекомендует использовать оба метода для определения MMR/MSI при метастатическом колоректальном раке и других опухолях из спектра синдрома Линча при рассмотрении вопроса о применении иммунотерапии, особенно при нетипичном характере экспрессии, зональной экспрессии или нетипичном выпадении экспрессии пар белков.

С какой целью выполняют исследование

Для скрининга, прогноза и возможности применения персонализированной терапии.

Литература

1. Бесова Н. С. и др. Практические рекомендации по лекарственному лечению рака желудка //Злокачественные опухоли. – 2022. – Т. 12. – №. 3S2-1. – С. 382-400.
2. Нечушкина В. М. и др. Практические рекомендации по лекарственному лечению рака тела матки и сарком матки //Злокачественные опухоли. – 2021. – Т. 11. – №. 3S2-1. – С. 218-232.
3. Федянин М. Ю. и др. Практические рекомендации по лекарственному лечению рака ободочной кишки, ректосигмоидного соединения и прямой кишки //Злокачественные опухоли. – 2022. – Т. 12. – №. 3S2-1. – С. 401-454.
4. Cortes-Ciriano I. et al. A molecular portrait of microsatellite instability across multiple cancers //Nature communications. – 2017. – Т. 8. – №. 1. – С. 15180.
5. Kim S. Y., Kim T. W. Current challenges in the implementation of precision oncology for the management of metastatic colorectal cancer //Esmo Open. – 2020. – Т. 5. – №. 2. – С. e000634.
6. Li K. et al. Microsatellite instability: a review of what the oncologist should know //Cancer cell international. – 2020. – Т. 20. – С. 1-13.
7. Nojadeh J. N., Sharif S. B., Sakhinia E. Microsatellite instability in colorectal cancer //EXCLI journal. – 2018. – Т. 17. – С. 159.

Правила подготовки к исследованию

Подготовку к исследованию определяет лечащий врач.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения: качественный тест.

Референсные значения: отсутствуют.

Форма представления результата

Морфологическая оценка опухоли согласно классификации ВОЗ с описанием проведенного ИГХ-исследования (оценка экспрессии используемого маркера в неопластических элементах).

Трактовка результатов исследования «Определение микросателлитной нестабильности иммуногистохимическим методом»

Обнаружение потери экспрессии белков системы репарации неспаренных нуклеотидов ДНК (MMR): MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 свидетельствует о наличии дефекта системы MMR.

Результаты теста следует интерпретировать в контексте клинической картины, семейного анамнеза и данных лабораторных исследований.