Рак предстательной железы - комплексное иммуноморфологическое исследование биоптатов предстательной железы с оценкой экспрессии AMACR (a-methylacyl-CoA racemase, P504S), цитокератинов высокого молекулярного веса (34bE12), белка p63

Метод определения

Гистологическое исследование биоптатов предстательной железы (окрашивание гематоксилином-эозином) с морфологической оценкой опухоли согласно гистологической классификации ВОЗ, определением степени злокачественности по шкале Глисона.

Иммуногистохимическое исследование с применением антител к цитокератинам высокомолекулярного веса (HMW, клон 34be12), белку р63 и альфа-метилацил-коА-рацемазе (AMACR) (пероксидазный и авидин-биотиновый методы).

Исследуемый материал парафиновый блок с биоптатами предстательной железы

Согласно требованиям п. 17 Правил проведения патолого-анатомических исследований, утв. Приказом Минздрава России от 24.03.2016 № 179н, в целях уточнения диагноза заболевания (состояния) с учетом требований стандартов медицинской помощи и клинических рекомендаций (протоколов лечения) по вопросам оказания медицинской помощи на этапе микроскопии биопсийного (операционного) материала врачом-патологоанатомом дополнительно может быть назначено проведение:

дополнительных методов окраски микропрепаратов (постановки реакции, определения) - гистохимических, иммуногистохимических, электронно-микроскопических, молекулярно-биологических, генетических и иных методов;
дополнительных методов микроскопии - поляризационной, флуоресцентной, трансмиссионной или сканирующей электронной и иных методов.

Применение вышеуказанных методов исследования, назначенных врачом-патологоанатомом при проведении исследования в целях уточнения диагноза заболевания (состояния), подлежит дополнительной оплате по стоимости, указанной в утвержденном прайс-листе медицинского центра ИНВИТРО

Комплекс иммуногистохимических маркеров для выявления аденокарциномы простаты.

Рак предстательной железы (РПЖ) входит в число наиболее частых онкологических заболеваний, поражающих мужское население разного возраста. Ранняя диагностика этого заболевания является приоритетной задачей современной урологии. Трансректальная биопсия предстательной железы с последующим гистологическим исследованием биоптата – метод, считающийся «золотым стандартом» диагностики при подозрении на РПЖ. Исследование позволяет выявить у пациента предраковое поражение (простатическая интраэпителиальная неоплазия: ПИН – prostatic intraepithelial neoplasia: PIN) или рак. А также определить локализацию опухоли, протяженность опухоли в биоптате, наличие периневральной инвазии или инвазии капсулы предстательной железы, стадию дифференцировки опухолевых клеток (градация по шкале Глисона). Однако, у части пациентов невозможно безошибочно определить злокачественный потенциал морфологических изменений, в частности, при выявлении так называемой атипической мелкоацинарной пролиферации» (atypical small acinar proliferation – ASAP). Этот термин используется в случаях, когда в биоптате выявляются фокусы атипических желез, подозрительных на аденокарциному, но, в то же время, не соответствующих минимальным диагностическим критериям РПЖ. Однако, данное определение является субъективным, собирательным, включает в себя как морфологические изменения, подозрительные в отношении аденокарциномы, так и фокусы аденокарциномы, в объеме не достаточном для постановки диагноза. В таких случаях необходимо комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование.

Параллельное исследование экспрессии AMACR, высокомолекулярных цитокератинов 34ßE12 и белка p63 рекомендовано Международным обществом урологической патологии (International Society of Urological Pathology – ISUP) при иммуногистохимическом исследовании биоптатов простаты, для выявления мелких очагов атипичных желез при подозрении на аденокарциному предстательной железы. Повышенная экспрессия AMACR в комбинации с отсутствием маркёров базальных клеток (высокомолекулярных цитокератинов 34ßE12 и белка p63) – типичны для классической ацинарной аденокарциномы простаты.

AMACR (P504S, альфа-метилацил-коэнзим А рацемаза) – белок, участвующий в бета-окислении разветвленных жирных кислот и метаболизме желчных кислот. Присутствие этого белка можно обнаружить в нормальных тканях – печени (гепатоциты), почках (тубулярный эпителий), легких (эпителий бронхов), желчном пузыре и др. В качестве маркёра опухолей он рассматривается с 2000 года, когда было продемонстрировано, что карциномы простаты характеризуются повышенной экспрессией AMACR. Это не является уникальным для рака предстательной железы. Повышенная экспрессия AMACR выявлена в карциномах - колоректальных, овариальных, груди, мочевого пузыря, легких, почечно-клеточных, а также лимфомах и меланоме. Считается, что это потенциально важный маркер различных видов рака и соответствующих предраковых поражений, в особенности, ассоциируемых с высоким потреблением животных жиров.

В исследованиях уротелиального рака отмечается положительная корреляция между экспрессией AMACR, высокой гистопатологической градацией опухоли и опухолевой прогрессией. Гиперэкспрессия AMACR в опухолевой ткани делает этот фермент потенциальной мишенью для противоопухолевой терапии. AMACR является высокоэффективным и чувствительным маркером при иммуногистохимической диагностике РПЖ и позволяет с высокой чувствительностью и специфичностью дифференцировать рак предстательной железы от других патологических процессов, а также более точно определить стадию заболевания. По данным исследований, маркер позитивен в 80-100% случаев карцином простаты и ПИН высокой степени.

Белок p63 экспрессируется в ядрах базальных клеток различных видов эпителия, является транскрипционным фактором, играя ключевую роль в регуляции процессов пролиферации и дифференцировки эпителия и тканевого гомеостаза. Ген р63 находится на хромосоме 3q27-29 и принадлежит к семейству p53 опухолевых супрессорных генов, связанных с регуляцией клеточного цикла, апоптоза и опухолевой трансформации. Роль этого белка при раке (как в качестве опухолевого супрессора, так и онкогена) продолжает исследоваться. Определение экспрессии р63 является важным инструментом для дифференцировки между доброкачественными и злокачественными изменениями в предстательной железе (а также может использоваться для дифференцировки плоскоклеточного рака легких и аденокарциномы легких, плоскоклеточного рака шейки и аденокарциномы шейки матки, рака молочной железы in situ и аденокарциномы молочной железы).

Высокомолекулярные цитокератины 34ßE12, как и p63, характерны для базального эпителия предстательной железы, исследование их экспрессии в комбинации с белком p63 повышает информативность и специфичность иммуногистохимического исследования биоптатов простаты. При РПЖ экспрессия цитокератинов высокомолекулярного веса (HMW) значительно снижается, что выявляется при ИГХ-исследовании.

Примечание: см. также тесты №5111ИГХ, №5222ИГХ (Ki-67-экспрессия, иммуногистохимическое исследование (MIB-1)) – лабораторное исследование для оценки потенциала злокачественности опухоли.

Литература

Аляев Ю.Г., Безруков Е.А., Шестиперов П.А. Молекулярная патология рака предстательной железы: диагностическая и прогностическая значимость основных маркеров // Онкоурология. 2006. № 2. C. 45-50.
Ефремов Г.Д. Роль иммуногистохимиив диагностике рака предстательной железы. Экспериментальная и клиническая урология, 2011, №1, с.55-55.
Франк Г.А. Морфология рака предстательной железы // Практическая онкология. 2008. Т. 9. № 2. C. 65-70.
Epstein J.I. et al. Best Pactices Recommendations in the Application of Immunohistochemistry in the Prostate: Report From the International Society of Urologic Pathology Consensus Conference. American Journal of Surgical Pathology: 2014, Volume 38, Issue 8, p e6–e19.
Evans A.J. Alpha-methylacyl CoA race-mase (P504S): overview and potential uses in diagnostic pathology as applied to prostate needle biopsies // J. Clin. Pathol. 2003. Vol. 56. P. 892-897.
Gordon IO., Tretiakova M.S., Noffsinger A.E., Hart.J., Reuter V.E., Al-Ahmadie H.A. Prostate-specific membrane antigen expression in regeneration and repair // Mod Pathol. 2008. Vol. 21. № 12. P. 1421-1427.
Hameed O., Sublett J., Humphrey P.A. Immunohistochemical stains for p63 and alpha-methylacyl-CoA racemase, versus a cocktail comprising both, in the diagnosis of prostatic carcinoma: a comparison of the immunohistochemical staining of 430 foci in radical prostatectomy and needle biopsy tissues //Am J Surg Pathol. 2005. Vol. 29. № 5. P. 579-587.
Jiang T., Jiang H., Song X.S., Li X.C., Li Q.L. P53 expression and its clinical significance in prostatic carcinoma // Zhonghua Nan Ke Xue. 2005. Vol.11. № 6. P. 448-451.
Nassar A., Amin M.B., Sexton D.G., Cohen C. Utility of alpha-methylacyl coen-zyme A racemase (p504s antibody) as a diagnostic immunohistochemical marker for cancer // Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2005. Vol. 13. № 3. P. 252-255.
Rubin M.A., Bismar T.A., Andren O., Mucci L., Kim R., Shen R., Ghosh D., Wei J.T., Chinnaiyan A.M., Adami H.O., Kantoff P.W., Johansson J.E. Decreased alpha-methylacyl CoA racemase expression in localized prostate cancer is associated with an increased rate of biochemical recurrence and cancer-specific death // Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2005. Vol. 14. № 6. P. 1424-1432.
Schlomm T., Iwers L., Kirstein P., Jessen B., Kollermann J., Minner S., Passow-Drolet A., Mirlacher M., Milde-Langosch K., Graefen M., Haese A., Steuber T., Simon R., Huland H., Sauter G., Erbersdobler A. Clinical significance of p53 alterations in surgically treated prostate cancers // Mod Pathol. 2008. Vol. 21. № 11. P. 1371-1378.
Young R.H., Srigley J.R., Amin M.B.,Ulbright T.M., Cubilla A.L. Tumors of the Prostate Gland, Seminal Vesicles, Male Urethra and Penis (fascicle 28) / a. 3rd Edition. AFIP: Washington, DC.