Электрофорез липопротеинов с типированием гиперлипидемий (Lipoprotein electrophoresis with typing of hyperlipidemias)

Описание

Метод определения

Разделение липопротеинов на фракции методом электрофореза в агарозном геле в сочетании с окраской липидов суданом черным (Sebia);
Разделение липопротеинов на фракции методом электрофореза в агарозном геле в сочетании с окраской холестерина энзиматическим методом (Helena).

Исследуемый материал Сыворотка крови

Электрофорез липопротеинов сыворотки крови применяют в качестве вспомогательного исследования при диагностике нарушений липидного обмена для уточнения типа гиперлипидемии.

Синонимы: Электрофорез липидов; Электрофорез липопротеидов сыворотки; Фракции липидов методом электрофореза. Lipoprotein electrophoresis: type of hyperlipidemia; Lipoprotein electrophoresis.

Краткая характеристика исследования липидов сыворотки крови методом электрофореза

Липопротеины плазмы крови осуществляют перенос липидов к тканям, где они используются для получения энергии, создания запасов липидов, продукции стероидных гормонов или образования желчных кислот и пр. Липопротеиновые частицы состоят из липидов (холестерина, триглицеридов, фосфолипидов) и белковых компонентов – аполипопротеинов. Аполипопротеины участвуют в поддержании структуры липопротеинов, их связывании с клеточными рецепторами, а также действуют в качестве активаторов или ингибиторов определенных ферментов, участвующих в метаболизме липидов. В крови выделяют шесть основных видов липопротеинов, отличающихся по размеру, плотности, липидному составу и входящим в их состав аполипопротеинам (см. табл. 1).

Табл. 1. Характеристики липопротеинов плазмы крови

Липопротеины	Плотность, г/мл	Диаметр, нм	Триглицериды, %	Эфиры холестерина, %	Холестерин, %	Фосфолипиды, %	Аполипопротеины
Липопротеины	Плотность, г/мл	Диаметр, нм	Триглицериды, %	Эфиры холестерина, %	Холестерин, %	Фосфолипиды, %	главный	другие
Хиломикроны	<0,95	80-100	90-95	2-4	1	2-6	Апо-В-48	ApoA-I, A-II, A-IV, A-V
ЛПОНП	0,95- 1,006	30-80	50-65	8-14	4-7	12-16	Апо-В-100	ApoA-I, C-II, C-III, E, A-V
ЛППП	1,006-1,019	25-30	25-40	20-35	7-11	16-24	Апо-В-100	ApoC-II, C-III, E
ЛПНП	1,019-1,063	20-25	4-6	34-35	6-15	22-26	Апо-В-100
ЛПВП	1,063-1,210	8-13	7	10-20	5	55	Апо-А-1	ApoA-II, C-III, E, M
Лп (а)	1,006-1,125	25-30	4-8	35-46	6-9	17-24	Апо(а)	ApoB-100

Обозначения: ЛПОНП – липопротеины очень низкой плотности; ЛППП – липопротеины промежуточной плотности; ЛПНП – липопротеины низкой плотности; ЛПВП – липопротеины высокой плотности; Лп(а) – липопротеин а.

Все апо-В-содержащие липопротеины диаметром менее 70 нм способны проникать через эндотелиальный барьер, особенно при дисфункции эндотелия сосудов. При этом они могут захватываться внеклеточными структурами сосудистой стенки с запуском патологического процесса, сопровождаемого локальной аккумуляцией холестерина и образованием атеросклеротической бляшки. Состояния, когда концентрация липидов и липопротеидов в крови выходит за пределы нормы, относят к дислипидемиям. Риск развития атеросклероза и сердечно-сосудистых заболеваний различается при разных типах дислипидемий и зависит от дисбаланса атерогенных (ЛПНП, ЛПП, ЛПОНП, Лп(а)) и антиатерогенных (ЛПВП) липопротеинов.

С какой целью проводят исследование липопротеинов сыворотки с применением электрофореза

Исследования липидного профиля чаще всего применяют для оценки риска развития сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений, поскольку нарушения баланса липидов являются важным и при этом доступным для модификации фактором риска. Для начального обследования рекомендовано применять хорошо стандартизированные рутинные биохимические тесты (см. № ОБС54 и № ОБС53). Вспомогательное исследование соотношения различных липопротеинов сыворотки с применением методов электрофореза может дать дополнительную информацию, как альтернативный способ оценки, в ситуациях, когда требуется уточнение характера выявленных сдвигов. Уточнение фенотипа дислипидемии помогает в выборе оптимальной терапии и выделении пациентов с вероятными наследственными формами нарушения обмена липидов, которым может быть показано проведение генетических тестов.

В настоящее время ВОЗ принята классификация гиперлипопротеидемий, предложенная D. Fredrickson (1965) на основе исследований с применением метода ультрацентрифугирования, согласно которой выделяют несколько фенотипов гиперлипидемий (табл. 2). Эта классификация не устанавливает диагноз, она фиксирует тип нарушения вне зависимости от того, является ли оно приобретенным или наследственным.

Табл. 2. Классификация гиперлипопротеидемий, принятая ВОЗ

Фенотип		Синоним	Повышение уровня липопротеидов плазмы	Повышение уровня липидов плазмы	Атерогенность	Частота (%) в структуре дислипидемий
I		Гиперхиломикронемия	Хиломикроны	Триглицериды и холестерин	-/ +	<1
II	a	Гиперхолестеринемия	ЛПНП	Холестерин	+++	10
II	b	Комбинированная гиперлипидемия	ЛПНП, ЛПОНП	Холестерин и триглицериды	+++	40
III		Наследственная дис-бета-липопротеидемия	ЛППП	Триглицериды и холестерин	+++	<1
IV		Наследственная гипертриглицеридемия	ЛПОНП	Триглицериды	+	45
V		Смешанная гиперлипидемия	Хиломикроны, ЛПОНП	Триглицериды и холестерин	+	5

Электрофорез липидов сыворотки крови позволяет разделить основные фракции липопротеинов на основе их разной электрофоретической подвижности (в том числе идентифицировать липопротеин Х (ЛпХ) – аномальный липопротеин, индикатор вероятного холестаза). Комплексная оценка соотношения липидных фракций с применением методов гель-электрофореза позволяет идентифицировать основные типы дислипидемий и установить вероятный тип гиперлипидемии по классификации ВОЗ.

Более подробно с лабораторной оценкой параметров липидного обмена можно ознакомиться здесь.

Литература

Подготовка

Правила подготовки к исследованию «Электрофорез липидов с типированием гиперлипидемий»

Натощак (после 10-12 часового периода ночного голодания, простую воду можно пить в обычном режиме). При невозможности соблюсти это требование для некоторых групп пациентов следует обсудить с лечащим врачом целесообразность проведения исследования не натощак и указать это обстоятельство в дополнительной информации по пациенту.

Отказ от приема алкоголя за 24 часа до взятия материала на исследование.

Воздержание от курения за 30 минут до взятия материала на исследование.

Не ранее, чем через 4-8 недель после инфаркта миокарда.

Показания к назначению

В каких случаях проводят исследование липидов сыворотки крови методом электрофореза:

вспомогательное исследование для определения характера нарушений липидного обмена;
оценка эффективности гиполипидемической терапии;
диагностика вторичных дислипидемий при сахарном диабете, нефротическом синдроме, хронической болезни почек, гипотиреозе, метаболическом синдроме, курении, алкоголизме, приеме кортикостероидов и оральных контрацептивов.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения и референсные значения при проведении исследования «Электрофорез липопротеинов с типированием гиперлипидемий»:

Показатель	Единицы измерения	Референсные значения *
Холестерин общий	ммоль/л	<5,0
Триглицериды	ммоль/л	<1,7
Исследование основных фракций липопротеинов сыворотки крови методом электрофореза 1
Альфа-липопротеины (ЛПВП)	%	22,3 – 53,3
Бета-липопротеины (ЛПНП)	%	38,6 – 69,4
Пре-бета-липопротеины (ЛПОНП)	%	4,4 – 23,1
Хиломикроны	%	н. о./следы
Быстрые пре-бета-липопротеины (Лп(а))	%	н. о.
Липопротеин Х (ЛпХ)	%	н. о.
Определение концентрации холестерина в липопротеинах сыворотки крови 2
Холестерин ЛПВП	ммоль/л	>1,0 – мужчины >1,2 – женщины
Холестерин ЛПНП	ммоль/л	<3,0
Холестерин ЛПОНП	ммоль/л	<0,8
Холестерин хиломикронов	ммоль/л	н. о.
Холестерин Лп (а)	ммоль/л	н. о.
Холестерин ЛпХ	ммоль/л	н. о.

Тип гиперлипидемии по классификации ВОЗ (при выявлении нарушений)		Соотношение липидных фракций в пределах референсных значений. Дислипидемии не выявлено.

Сокращения: ЛПОНП – липопротеины очень низкой плотности; ЛПНП – липопротеины низкой плотности; ЛПВП – липопротеины высокой плотности; Лп(а) – липопротеин а, ЛпХ – липопротеин Х; н. о. – ниже предела обнаружения методом электрофореза.

Примечания

Разделение липопротеинов на фракции методом электрофореза в сочетании с окраской липидов суданом черным.
Разделение липопротеинов на фракции методом электрофореза в сочетании с окраской холестерина энзиматическим методом.

* Для холестерина общего, холестерина ЛПНП, холестерина ЛПВП и триглицеридов приведены пороги, рекомендуемые к использованию при оценке сердечно-сосудистых рисков.

Альтернативные единицы измерения концентрации холестерина: мг/дл.

Пересчет единиц измерения концентрации холестерина: мг/дл х 0,0259 => ммоль/л.

Альтернативные единицы измерения концентрации триглицеридов: мг/дл.

Пересчет единиц измерения концентрации триглицеридов: мг/дл х 0,0113 => ммоль/л.