Антитела, количественные, к спайковому (S) белку (RBD) SARS-CoV-2, IgG (Anti-SARS-CoV-2, spike (S) protein (RBD), IgG, quantitative)

Описание

Метод определения

Хемилюминесцентный иммуноанализ (технология Architect, Abbott. SARS-CoV-2 IgG II Quant), количественный тест.

Исследуемый материал Сыворотка крови

A09.05.054.000.01 (Номенклатура МЗ РФ, Приказ №804н)

Для проведения исследования в медицинских офисах необходимо предъявить СНИЛС и документ удостоверяющий личность.

Синонимы: Анализ крови для количественного определения IgG-антител к спайковому (S) белку SARS-CoV-2; Количественное определение IgG антител к RBD домену S-белка SARS-CoV-2; IgG Антитела к коронавирусу SARS-CoV-2, включая нейтрализующие IgG; Тест на IgG антитела к спайковому (S) белку коронавируса; Антитела к рецептор-связывающему домену вируса, вызывающего COVID-19, Иммунитет к коронавирусу SARS-CoV-2; Антитела класса G к SARS-CoV-2 RBD; Анти-RBD антитела класса G.

Antibodies to RBD domain of spike (S) protein SARS-CoV-2, IgG; Antibodies IgG for RBD SARS-CoV-2 spike (S) protein; IgG antibodies to SARS-CoV-2 RBD domain of spike (S) protein of SARS-CoV-2; Сoronavirus immunity.

Диапазон количественного измерения: 2,9 - 5680 BAU/мл.

Общая информация об исследовании «Антитела, количественные, к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgG»

SARS-CoV-2 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 – тяжелого острого респираторного синдрома коронавирус 2) – официальное наименование вируса, вызвавшего эпидемию COVID-19. COVID-19 (coronavirus disease 2019 – коронавирусная болезнь 2019) – название болезни, которую индуцирует новый вид коронавируса.

Источником передачи инфекции SARS-CoV-2 является, в большинстве случаев, больной человек, в том числе находящийся в инкубационном периоде заболевания, который составляет от 2 до 14 (в среднем 5-7) дней. Клинические проявления могут быть аналогичны неспецифичным симптомам ОРВИ (повышение температуры, сухой кашель, затруднение дыхания). Дополнительные эпидемиологические признаки – вероятный либо подтвержденный контакт с больными COVID-19, а также проявления в виде пневмонии с характерными изменениями в легких по данным компьютерной томографии (КТ), свидетельствуют о высокой вероятности COVID-19.

SARS-CoV-2 стимулирует гуморальный и клеточный ответ иммунной системы инфицированного человека. Гуморальный ответ характеризуется продукцией антител IgM и IgG классов, которые способны специфически распознавать и связывать чужеродные белки, характерные для патогена, участвуя в механизмах его нейтрализации и удаления. Антитела класса IgM появляются первыми, через несколько дней от появления симптомов. Почти одновременно или вскоре вслед за ними появляются IgG (более, чем у половины пациентов в период 8-14 дней от возникновения клинических признаков инфекции, а в период от 15 дней и более – у 99% пациентов). По уровню и динамике концентрации антител в крови гуморальный иммунный ответ индивидуально варьирует, в том числе в зависимости от тяжести болезни. Уровень IgM снижается до неопределяемого обычно в пределах до одного, реже – двух месяцев от начала заболевания, в то время как IgG антитела могут сохраняться в крови длительное время (3-5 месяцев и более), выполняя защитную функцию.

Четыре структурных белка, которые кодирует РНК вируса SARS-CoV-2, – это спайковый (S), оболочечный (E), нуклеокапсидный (N) и мембранный (M). Структуры, выступающие на поверхности вируса подобно шипам и придающие вириону сходство с короной, сформированы спайковым (S) белком. S-белок состоит из двух субъединиц (S1 и S2). Нуклеокапсидный и спайковый белки в ходе инфекции вызывают наиболее выраженный антительный ответ. При этом нейтрализующая активность антител, вырабатываемых против SARS-CoV-2, преимущественно соотносится с антителами к S-белку (который является главной мишенью в вакцинологии). На S1 субъединице этого белка располагается рецептор-связывающий домен (RBD), который способен прочно связываться с рецепторами ангиотензин-превращающего фермента (ACE2), расположенными на клетках различных тканей, в том числе на эпителии легочных альвеол. Взаимодействие RBD домена с рецепторами ACE2 является начальным этапом внедрения вируса в клетку. Антитела, специфически связывающиеся с RBD областью S1 субъединицы спайкового белка коронавируса, способны ингибировать его связывание с клеточными рецепторами, оказывая выраженный нейтрализующий эффект.

С какой целью используют количественное определение уровня антител к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgG

Присутствие специфических антител к вирусу SARS-CoV-2 класса G указывает на факт недавнего или прошлого взаимодействия с вирусом. Поэтому такие тесты используют в комплексной диагностике при наличии подозрений на инфекцию новым коронавирусом или ее осложнения. Основной метод лабораторного подтверждения острой инфекции COVID-19 – выявление методами полимеразной цепной реакции (ПЦР) РНК вируса в биоматериале, взятом из дыхательных путей, обычно в мазке из носоглотки и ротоглотки. Однако информативность РНК-тестирования зависит от достаточности содержания вируса в биоматериале выбранной локализации на той или иной стадии инфекции, а также качества взятия материала. Наиболее информативны ПЦР-исследования мазков из рото- и носоглотки в первые 1-5 дней от начала клинических проявлений инфекции. На более поздних сроках (более 1-2 недель) целесообразно дополнительно к ПЦР-тестированию мазков применять исследование крови на наличие специфических антител, вырабатываемых организмом в ответ на инфекцию SARS-CoV-2.

Оценка уровня IgG антител к SARS-CoV-2 может использоваться также с целью выявления иммунологических свидетельств прошлой (в том числе субклинической или бессимптомной) инфекции для оценки вероятного иммунного статуса обследуемого человека по отношению к этому вирусу, прослеживания контактов, популяционных эпидемиологических исследований.

Поскольку большинство зарегистрированных и разрабатываемых вакцин против SARS-CoV-2 нацелено на антитела к S-белку, количественное определение уровня IgG антител к SARS-CoV-2 S-белку (RBD) может быть информативным методом оценки динамики иммунного ответа на вакцинацию такими препаратами (в частности, для оценки ответа на применение вакцины Гам-КОВИД-Вак – «Спутник V»), Спутник Лайт, Спутник М, а также цельновирионных инактивированных вакцин (в том числе – КовиВак производства ФНЦ им. М.П. Чумакова) и вакцин на основе мРНК S-белка (в частности - вакцин Pfizer-BioNTech, Moderna и AstraZeneca, и Johnson & Johnson’s (Janssen) или другие). Тест не применим для оценки иммунитета после вакцинации вакциной ЭпиВакКорона)).

Следует отметить, что результаты предлагаемого теста количественного исследования IgG антител к SARS-CoV-2 S-белку (RBD), независимо от используемой антигенной мишени, нельзя считать прямым методом определения нейтрализующих антител, поскольку оценка нейтрализующей активности антител требует специальных методов, малодоступных для рутинного практического использования. Но результаты этого теста проявляют очень высокую корреляцию с результатами тестов нейтрализации при проведении параллельных исследований.

Когда (спустя какой срок) можно определять уровень антител к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgG после вакцинации

Оценка напряженности поствакцинального протективного иммунитета должна проводиться с использованием тест-систем, специфичных к наличию S-белка или RBD домену S-белка вируса SARS-CoV-2, не ранее чем на 42-й день после первого этапа вакцинации.

Литература

Временные методические рекомендации. Профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции (COVID-19). Версия 11 (07.05.2021). МЗ РФ.
Диагностическое тестирование для определения вируса SARS-CoV-2. Временные рекомендации. 11 сентября 2020. ВОЗ.
<Письмо> Минздрава России от 28.12.2020 № 1/и/1-9601 «О порядке проведения вакцинации против COVID-19 взрослому населению».
Bohn M. K. et al. IFCC interim guidelines on serological testing of antibodies against SARS-CoV-2 //Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (CCLM). – 2020. – Т. 58. – №. 12. – С. 2001-2008.
Li X. et al. Lu Sh //Molecular immune pathogenesis and diagnosis of COVID-19, J Pharmaceutical Analysis. – 2020. – Т. 10. – №. 2. – С. 102-8.
Lippi G., Horvath A. R., Adeli K. Editorial and executive summary: IFCC Interim Guidelines on clinical laboratory testing during the COVID-19 pandemic //Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (CCLM). – 2020. – Т. 58. – №. 12. – С. 1965-1969.
Okba N. M. A. et al. Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2− specific antibody responses in coronavirus disease patients //Emerging infectious diseases. – 2020. – Т. 26. – №. 7. – С. 1478-1488.
Walls A. C. et al. Structure, function, and antigenicity of the SARS-CoV-2 spike glycoprotein //Cell. – 2020. – Т. 181. – №. 2. – С. 281-292. e6.
Материалы фирмы-производителя реагентов.
Письмо Росздравнадзора (РЗН) от 05.07.2021 «О международном формате оценки уровня иммуноглобулинов, в том числе IgG, к SARS-CoV-2»
Кондрашева Е.А., Игонина Н.А., Сысоева С.Н., Хабибулин Д.Ф. Клинические характеристики тест-системы ARCHITECT SARS-CoV-2 IgG II Quant (Abbott) для количественного определения уровня антител класса G к рецепторсвязывающему домену (RBD) спайкового белка вируса SARS-CoV-2. «Справочник заведующего КДЛ», №6, 2021, стр. 31-37.

Подготовка

Правила подготовки к исследованию крови на количественное определение уровня антител к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgG

Специальной подготовки не требуется.

Показания к назначению

В каких случаях проводят анализ крови на количественное определение уровня антител к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgG:

в целях уточняющей диагностики COVID-19 и ее осложнений, в дополнение к ПЦР-тестам (исследование специфических IgG целесообразно проводить после 1-2 недель от начала заболевания);
для оценки наличия и уровня специфических антител к SARS-CoV-2 в результате прошлой инфекции (в т. ч. субклинической или бессимптомной);
оценка иммунного ответа на вакцинацию (препаратами вакцин с использованием S-белка, в том числе Гам-КОВИД-Вак («Спутник V», Спутник Лайт), КовиВак и вакцин на основе мРНК S-белка (в частности - вакцин Pfizer-BioNTech и Moderna или другие). Тест не применим для оценки иммунитета после вакцинации вакциной ЭпиВакКорона).

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Трактовка результатов исследования на количественное определение уровня антител к спайковому (S) белку SARS-CoV-2, IgG

< 7,1 BAU/мл – отрицательный;

≥ 7,1 BAU/мл – положительный.

По информации производителя реагентов (Abbott Laboratories – Эбботт Лэбораториз), основанной на результатах первого исследования Международного стандарта ВОЗ иммуноглобулина против SARS-CoV-2 (человека) (код NIBSC 20-136), которое продемонстрировало прекрасную корреляцию (r = 0,9990) с текущей стандартизацией количественных тест-систем SARS-CoV-2 IgG II Quant: математическое соотношение единицы Abbott AU/мл (Ед/мл) с единицей ВОЗ (единица связывания антител на мл [BAU/мл]) будет описываться уравнением: BAU/мл = 0,142 х AU/мл.

Установленная количественная связь с Международным стандартом ВОЗ может помочь в стандартизации серологических тестов на SARS-CoV-2 и обеспечить лучшую гармонизацию данных между лабораториями. Это облегчит текущие исследования иммунного ответа на вирус, связанного с естественной инфекцией, вакцинацией и терапевтическим лечением.

«Положительно»

Наличие иммунного ответа вследствие воздействия вируса SARS-CoV-2 (недавнего или прошлого).
Ответ на вакцинацию против данного вируса препаратами вакцин на основе S-белка (в том числе Гам-КОВИД-Вак – «Спутник V», Спутник Лайт) и КовиВак.

Положительный результат указывает на вероятность наличия нейтрализующих антител и, тем самым, определенной защиты от повторного инфицирования. Однако в настоящее время не существует разработанных международных стандартов, утвержденных тест-систем или порогов, рекомендуемых для подтверждения наличия иммунитета против SARS-CoV-2.

«Отрицательно»

Отсутствие или очень низкий уровень IgG антител к исследуемому патогену, что возможно в следующих ситуациях:

Не было воздействия SARS-CoV-2 в прошлом.
Инкубационный период и очень ранние стадии инфекции (первая неделя от начала клинических проявлений).
Инфекция у пациентов с нарушениями функций иммунной системы, когда развитие антительного ответа может быть замедленным и сниженным.
Уровень антител может снижаться до неопределяемого в отдаленные сроки после перенесенной в прошлом инфекции (чаще более 3-5 месяцев, длительность персистенции антител точно не установлена, индивидуально отличается).

Внимание! Результат теста не следует использовать в качестве единственного основания для постановки диагноза или исключения инфекции SARS-CoV-2. Интерпретацию проводит врач в контексте клинической ситуации, в комплексе с анамнезом и результатами других методов обследования.

Примечание. Применение препаратов на основе моноклональных антител в целях диагностики или лечения (которые могут приводить к появлению HAMA – человеческих антимышиных антител), регулярный профессиональный контакт с животными и с сывороткой животных (который может приводить к появлению гетерофильных антител), присутствие в крови ревматоидного фактора могут вести к интерференциям в методах иммуноанализа (ложному завышению или занижению результата).