Сдать анализ на фенотипирование лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD19, CD 16,56)

Метод определения Иммунофенотипирование (проточная цитофлюориметрия, безотмывочная технология)

Исследуемый материал Цельная кровь (с ЭДТА)

A12.30.012.005 (Номенклатура МЗ РФ, Приказ №804н)

Синонимы: Иммунофенотипирование; Клеточный иммунитет; Субпопуляции лимфоцитов.

Immunophenotyping; Human Leukocyte Differentiation Antigens; Lymphocyte subsets.

В профиль входят следующие исследования:

лимфоциты, абсолютное значение
Т-лимфоциты (CD3+)
Т-хелперы (CD3+CD4+)
Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+)
иммунорегуляторный индекс (CD3+CD4+/CD3+CD8+)
В-лимфоциты (СВ19+)
ЕК-клетки (CD3-CD16+CD56+)
Т-ЕК-клетки (CD3+CD16+CD56+)

Краткое описание исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

Лимфоциты составляют 20-40% от всего числа лейкоцитов, относятся к агранулоцитам (не содержат гранул в цитоплазме), представлены гетерогенными субпопуляциями клеток, которые не отличаются по морфологии, но несут на поверхности разные специфические рецепторы (молекулы, называемые кластерами дифференцировки), и выполняют различные функции.

В числе таких функций: распознавание различных антигенов благодаря экспрессии на поверхности клеток уникальных антигенных рецепторов, формирование гуморального иммунного ответа к чужеродным белкам путем синтеза антител (иммуноглобулинов различных классов), обеспечение клеточного иммунитета − уничтожение разных клеток непосредственно эффекторными цитотоксическими лимфоцитами (отторжение трансплантата, противоопухолевый иммунитет, иммунитет против внутриклеточных паразитов, в том числе противовирусный). Часть лимфоцитов является клетками памяти, которые сохраняют информацию о ранее встречавшемся антигене.

Кластеры дифференциации лимфоцитов

Лимфоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. Эти структуры при иммунофенотипировании лимфоцитов являются антигенными маркерами различных субпопуляций лимфоцитов, присутствие которых определяют с помощью флуорохром-меченых моноклональных антител, что позволяет определить их количественное содержание с применением поточной цитофлюометрии. Поверхностные антигенные структуры на клетках, выявляемые моноклональными антителами, назвали кластерами дифференциации (CD, Clusters of Differentiation).

Кластерам дифференциации в целях стандартизации присвоены определенные номера. Используя флуорохром-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно определить содержаниея лимфоцитов, относящихся к различным по функциям или стадии развития субпопуляциям. Это позволяет понять природу некоторых заболеваний, оценить состояние пациента, следить за течением заболевания и прогнозировать его дальнейшее развитие.

Характеристика основных субпопуляций лимфоцитов

Т-лимфоциты – лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе (отсюда их название). Они происходят из клеток-предшественников костного мозга, которые мигрируют в тимус для созревания, селекции и последующего экспорта на периферию, участвуют в обеспечении клеточного иммунного ответа и контроле работы В-лимфоцитов, ответственных за образование антител (гуморальный иммунный ответ). Т-клетки координируют различные аспекты адаптивного иммунитета на протяжении всей жизни, включая реакцию на патогены, аллергены и опухоли.

Т-хелперы (от англ. to help – помогать) представляют собой разновидность Т-лимфоцитов и несут на своей поверхности структуры, способствующие распознаванию антигенов, презентированных вспомогательными клетками. Участвуют в регуляции иммунного ответа, вырабатывая различные цитокины.

Цитотоксические Т-клетки распознают фрагменты антигена на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в область контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней.

В-лимфоциты (от лат. bursa – сумка, по названию сумки Фабрициуса, в которой созревают эти лимфоциты у птиц) проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты делятся и дифференцируются в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет.

ЕК-клетки (естественные киллерные клетки, или натуральные киллеры) – клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически измененным клеткам-мишеням. ЕК-клетки не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам. EKT-клетки – это клетки с естественной неиммунной киллерной активностью, имеющие признаки Т-лимфоцитов.

При интерпретации результатов оценки содержания субпопуляций лимфоцитов важно обращать внимание на их абсолютное количество.

Специфические кластеры дифференциации антигенов

CD3 – поверхностный маркер, специфичный для всех клеток субпопуляции Т-лимфоцитов. CD3 является корецептором Т-клеточного рецептора (TCR), отвечающего за распознавание процессированных антигенов, связанных с молекулами главного комплекса гистосовместимости. CD3 необходим для экспрессии TRC на клеточной поверхности и обеспечивает передачу сигнала внутрь клетки.

CD4 характерен для хелперных Т-клеток. Экспрессируется также на моноцитах, макрофагах, дендритных клетках. Он связывается с молекулами MHC класса II (Major Histocompatibility Complex; главный комплекс гистосовместимости 2 класса), которые находятся на антигенпрезентирующих клетках, облегчая распознавание пептидных антигенов.

CD8 характерен для супрессорных и/или цитотоксических Т-клеток, ЕК-клеток, большей части тимоцитов. Это рецептор Т-клеточной активации, который облегчает распознавание клеточно-связанных антигенов MHC класса I.

CD16 используется вместе с CD56 преимущественно для идентификации ЕК-клеток. Представлен также на макрофагах, тучных клетках, нейтрофилах, некоторых Т-клетках. Это компонент рецепторов, связанных с IgG, опосредующих фагоцитоз, продукцию цитокинов и антителозависимую клеточную цитотоксичность.

CD19 присутствует на B-клетках, их предшественниках, фолликулярных дендритных клетках, считается самым ранним маркером B-клеточной дифференциации. Регулирует развитие, дифференциацию и активацию B-клеток.

CD56 – прототипный маркер ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток, присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD56-позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD56-негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гомофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.

С какой целью выполняют Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56

Фенотипирование с количественным определением содержания основных субпопуляций лимфоцитов применяют в целях скрининговой оценки общего иммунного статуса, в том числе, в комплексных исследованиях при первичных иммунодефицитах, лимфопролиферативных заболеваниях (при которых характеристика лимфоидных клеток с точки зрения происхождения предоставляет врачу ценную информацию для прогноза и определения соответствующей терапии), ВИЧ-инфекции, аутоиммунных заболеваниях, а также для оценки изменений при иных видах патологии, которые могут стать причиной вторичных иммунодефицитов, и мониторинга состояния и контроля терапии пациентов с иммунодефицитными, аутоиммунными состояниями, пациентов после трансплантации органов и пр.

Литература

Аллергология и иммунология. Национальное руководство. – М. : Изд. «ГЭОТАР-Медиа». – 2013. – 640 с.
Васильева М. М., Сай И. А. Первичные иммунодефициты с преимущественным нарушением синтеза антител //Управленческая подготовка руководителей медицинских организаций. – С. 24.
Ву А. Г. Б. Клиническое руководство Тица по лабораторным тестам //Ред. А. Ву (пер. с англ. ВВ Меньшикова).–4-е издание–М., Лабора. – 2013.
Клиническая иммунология и аллергология. Оксфордский справочник. 3 изд. – М. : Изд. «ГЭОТАР-Медиа». – 2019. – 832 с.
Ковальчук Л. В. Клиническая иммунология и аллергология с основами общей иммунологии : учебник / Ковальчук Л. В., Ганковская Л. В., Мешкова Р. Я. – М. : Изд. «ГЭОТАР-Медиа». – 2012. – 640 с.
Первичные иммунодефициты с преимущественной недостаточностью синтеза антител. Клинические рекомендации. МЗ РФ. – 2022.
Fernandes J. Обследование пациентов с признаками иммунодефицита. Справочник MSD. Профессиональная версия.
Kumar B. V., Connors T. J., Farber D. L. Human T cell development, localization, and function throughout life //Immunity. – 2018. – Т. 48. – №. 2. – С. 202-213.
Luckheeram R. V. et al. CD4+ T cells: differentiation and functions //Clinical and developmental immunology. – 2012. – Т. 2012.
Yong C. S. et al. Metabolic orchestration of T lineage differentiation and function //FEBS letters. – 2017. – Т. 591. – №. 19. – С. 3104-3118.

Правила подготовки к исследованию «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

Строго натощак (в период с 7.00 до 11.00) после ночного периода голодания от 8 до 14 часов.

Накануне исследования необходимо исключить повышенные психоэмоциональные и физические нагрузки (спортивные тренировки), прием алкоголя, за час до исследования – курение.

В каких случаях проводят Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56:

рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением;
подозрение на генетически обусловленный или приобретенный иммунодефицит;
аутоиммунные болезни;
аллергические заболевания;
онкологические заболевания;
обследование реципиентов до и после трансплантации органов;
обследование пациентов перед серьезными оперативными вмешательствами;
осложненное течение послеоперационного периода;
контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Референсные значения

Референсные значения субпопуляций лимфоцитов

Возраст	% от общего количества лимфоцитов	Абсолютное количество клеток х 106/л
СD3 + (Т-лимфоциты)
1 - 3 мес.	55 - 78	2070 - 6540
3 мес. - 1 год	45 - 79	2280 - 6450
1 - 2 года	53 - 81	1460 - 5440
2 - 6 лет	62 - 80	1610 - 4230
6 - 16 лет	66 - 76	1400 - 2000
> 16 лет	60 - 89	880 - 2400
CD3+CD4+ (Т-хелперы)
1 - 3 мес.	41 - 64	1460 - 5116
3 мес. - 1 год	36 - 61	1690 - 4600
1 - 2 года	31 - 54	1020 - 3600
2 - 6 лет	35 - 51	900 - 2860
6 - 16 лет	33 - 41	700 - 1100
> 16 лет	31 - 61	540 - 1460
CD3+CD8+ (Т-цитотоксические лимфоциты)
1 - 3 мес.	16 - 35	650 - 2450
3 мес. - 1 год	16 - 34	720 - 2490
1 - 2 года	16 - 38	570 - 2230
2 - 6 лет	22 - 38	630 - 1910
6 - 16 лет	27 - 35	600 - 900
> 16 лет	14 - 36	210 - 1200
CD19+ (В-лимфоциты)
1 мес. - 2 года	19 - 31	500 - 1500
2 - 6 лет	21 - 28	700 - 1300
6 - 16 лет	12 - 22	300 - 500
> 16 лет	5 - 19	100 - 480
CD3-CD16+CD56+ (ЕК-клетки)
1 - 4 мес.	2 - 14	40 - 915
4 мес. - 1 год	2 - 13	40 - 915
1 - 2 года	3 - 16	40 - 915
2 - 6 лет	4 - 23	96 - 1330
6 - 12 лет	4 - 26	96 - 1330
12 - 16 лет	6 - 27	100 - 500
> 16 лет	4 - 26	78 - 470
CD3+CD16+CD56+ (ЕКТ-клетки)
1 мес. - 16 лет	0 - 10	–
>16 лет	1 - 13	–
ИРИ (иммунорегуляторный индекс, соотношение CD3+CD4+ / CD3+CD8+
1 - 3 мес.	1,30 - 3,50	1 - 3 мес.
3 - 12 мес.	1,20 - 3,50	3 - 12 мес.
1 - 2 года	1,00 - 3,00	1 - 2 года
2 - 6 лет	1,00 - 2,10	2 - 6 лет
6 - 16 лет	1,10 - 1,40	6 - 16 лет
>16 лет	1,00 - 3,50	>16 лет

Трактовка результатов исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

Значение отклонений некоторых иммунологических показателей

Показатель	Повышение показателя	Снижение показателя
Т-лимфоциты (CD3+)	Иммунное воспаление. Ответ по Тh 1 типу. Ответ по Тh 2 типу.	Гипореактивность (иммунологический паралич)
Т-хелперы, Тh (CD4+)	Активный (острый) воспалительный процесс. При иммунном воспалении: ответ по Тh 1 типу – при инфекционных (вирусных, бактериальных) заболеваниях; по Тh 2 типу – при аллергическом воспалении; при аутоиммунном воспалении – ответ по Тh 1 или 2 типу (при генерализации аутоиммунного процесса).	Гипореактивность (иммунологический паралич). Снижение CD4+ лимфоцитов – основной лабораторный признак вторичного иммунодефицитного состояния
Т-цитотоксические (CD8+)	Активный воспалительный процесс при инфекциях: вирусных, других внутриклеточных, грибковых; при онкологических заболеваниях.	Аутоиммунные, аллергические заболевания
В-лимфоциты (CD19+)	Ответ по Тh 2 типу. Острый или активный хронический воспалительный процесс (инфекционный, аллергический, аутоиммунный).	Гипореактивность, перераспределение в очаги воспаления
Естественные киллеры, ЕК (СD3-CD16+ CD56+)	Острые инфекции, активный воспалительный процесс, избыток бактериального или вирусного антигена, избыток суперантигена (комплекса Аг+РНК, образующегося в макрофагах), онкопроцессы.	Снижение относительного содержания ЕК отмечено при высоком уровне Т-лимфоцитов
Т-ЕК-клетки (CD3+CD16+ CD56+)	Длительные хронические воспалительные процессы, тяжелое течение воспалительных процессов, длительная персистенция антигена в организме.	Не имеет диагностического значения

Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56 (Lymphocyte phenotyping (main subsets panel): CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56)

Краткое описание исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

С какой целью выполняют Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56

Литература

Правила подготовки к исследованию «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

В каких случаях проводят Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56:

Трактовка результатов исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

Цена исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56 (Lymphocyte phenotyping (main subsets panel): CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56)» в Мирном - 4060 руб.

Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56 (Lymphocyte phenotyping (main subsets panel): CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56)

Краткое описание исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

С какой целью выполняют Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56

Литература

Правила подготовки к исследованию «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

В каких случаях проводят Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56:

Трактовка результатов исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

Что еще заказывают с этим анализом

Цена исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56 (Lymphocyte phenotyping (main subsets panel): CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56)» в Мирном - 4060 руб.