T-SPOT.TB – иммунодиагностика туберкулезной инфекции, тест высвобождения гамма-интерферона (T-SPOT.TB – Interferon-Gamma Release Assays, IGRA)

Описание

Метод определения T-SPOT.TB (Oxford Immunotec) с применением специально подобранных антигенов ESAT-6 и CFP-10, входящих в состав микобактерий комплекса M. tuberculosis. Используется технология ELISPOT (Enzyme-Linked ImmunoSpot), позволяющая выявлять в образце крови присутствие реактивных (специфически сенсибилизированных) Т-эффекторных клеток, продуцирующих интерферон в ответ на воздействие указанных антигенов.

Исследуемый материал Цельная кровь (литий-гепарин)

День и время взятия, пожалуйста, уточняйте по телефону.

Исследование крови, допустимое в качестве альтернативы кожному тесту (проба Манту) для выявления туберкулезной инфекции.

Туберкулез – инфекционное хроническое заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex). Варианты развития ситуации после проникновения возбудителя туберкулеза в организм человека следующие:

полная элиминация (удаление) микобактерий туберкулеза из организма;
развитие первичного туберкулеза (при быстром росте и размножении бактерий);
«латентная инфекция» (микобактерии персистируют в организме в неактивном состоянии, обуславливая стойкий иммунный ответ на антигены возбудителя при отсутствии клинических проявлений активной формы заболевания). Это состояние у многих инфицированных может сохраняться на протяжении всей жизни. Такие лица не распространяют инфекцию, но у части пациентов латентная инфекция в течение жизни может перейти в клинически манифестированное заболевание. Риск прогрессии латентной инфекции в активное заболевание увеличивается при ослаблении иммунной системы.

Активная туберкулезная инфекция диагностируется по комплексу клинических симптомов, медицинской истории пациента, данным рентгенологических исследований и результатам прямых методов лабораторного выявления Mycobacterium tuberculosis в мокроте или мазках (микробиологические культуральные методы, выявление ДНК возбудителя с применением ПЦР).

Диагностика латентной инфекции затруднена отсутствием клинических и рентгенологических признаков заболевания, а также отсутствием возбудителя в пробах доступного биоматериала. Однако ее выявление важно для определения лиц, нуждающихся в контроле и превентивной терапии.

В настоящее время существуют два подхода к выявлению вероятной латентной инфекции:

in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
in vitro: оценка ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).

Оба подхода основаны на оценке характера иммунной реакции человека на антигены возбудителя, т. е. не являются методами прямого выявления инфекционного агента.

В связи с достаточно высокой распространенностью туберкулеза в нашей стране, Министерство здравоохранения РФ рекомендует ежегодно проводить скрининговое обследование детей в возрасте от 1-го года до 17-ти лет на наличие туберкулезной инфекции (в том числе при поступлении в детские сады и школы). Профилактическое скрининговое обследование обычно проводят с использованием внутрикожных проб. При наличии определенных противопоказаний или информированном отказе родителей от применения внутрикожных проб ребенку допускается назначение альтернативных методов обследования. Они включают исследование крови, основанное на выявлении высвобождения гамма-интерферона специфически сенсибилизированными лимфоцитами. На данный момент имеются два коммерческих диагностических теста этого направления: 1) QuantiFERON®-TB Gold; и 2) T-SPOT.TB (зарегистрирован в России).

Тест T-SPOT.TB допускается к использованию клиническими рекомендациями МЗ РФ и Российского общества фтизиатров по выявлению и диагностике туберкулеза у детей (2017). В соответствии с рекомендациями, при проведении скринингового обследования детей отрицательный результат T-SPOT.TB при отсутствии клинических симптомов заболевания (респираторного и интоксикационного характера, других локальных патологических проявлений) позволяет врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза.

К достоинствам этого метода можно отнести то, что подбор специфических антигенов исключает ложноположительные реакции, связанные с предшествующей вакцинацией БЦЖ (такие антигены отсутствуют на линиях Bacillus Calmette-Guerin, BCG) и перекрестными реакциями с большинством нетуберкулезных микобактерий окружающей среды (за исключением M. kansasii, M. szulgai и M. marinum). Напротив, лица, инфицированные микобактериями туберкулезного комплекса (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M. microti, M. canetti) обычно имеют в крови Т-клетки, распознающие эти и другие антигены таких бактерий.

T-SPOT.TB тест не позволяет различать латентную инфекцию и активное заболевание.

Следует учитывать, что чувствительность и специфичность подобных методов в целях скрининга туберкулезной инфекции не достигают 100%. Поэтому такие тесты следует применять с учетом общей оценки индивидуального риска в комплексе со стандартными методами диагностики.

Литература

Подготовка

Адреса и график приема б/м

г. Москва и Московская область

Прием биоматериала в медицинских офисах Москвы и области: ежедневно до 12:30 (кроме МЦ Измайловский (г. Москва, Измайловский проезд, д.10, корп. 3) и МЦ Нагатинская (г. Москва, ул. Нагатинская, дом 1, стр. 1).

В МЦ Нагатинская прием биоматериала в будни до 17:30, в выходные до 14:30.

В МЦ Измайловский прием биоматериала ежедневно до 22:00.

г. Санкт-Петербург

Прием биоматериала доступен только в следующих МО.

Ярославская область:

Взятие б/м возможно в любой день недели, но оформление пациентов и взятие б/м возможно строго до приезда первого курьера. После приезда первого курьера оформление пациентов и взятие б/м в текущий день не осуществляется.

г. Углич, ул. Ленина д.41/24А взятие б/м ежедневно с 8.00 до 11.00

Калужская область:

г. Калуга, пер. Старичков д.16, взятие б/м ежедневно с 8.00 до 11.00

г. Обнинск, пр-т Маркса д. 49, взятие б/м ежедневно с 8.00 до 14.00

Правила подготовки к исследованию «T-SPOT.TB – иммунодиагностика туберкулезной инфекции, тест высвобождения гамма-интерферона»

Предварительно уточнить допустимое время, день недели и медицинский офис, где можно сдать пробу крови для проведения данного исследования.

Специальной подготовки не требуется.

Применение T-SPOT.TB теста не оценивали у пациентов, получавших противотуберкулезную терапию более одного месяца.

Во избежание сомнительных результатов рекомендуем сдавать T-SPOT не ранее, чем через 2 месяца от проведения пробы Диаскин-теста. Перед проведением T-SPOT проконсультируйтесь с лечащим врачом.

Показания к назначению

В каких случаях проводят анализ «T-SPOT.TB – иммунодиагностика туберкулезной инфекции, тест высвобождения гамма-интерферона»:

в качестве альтернативы кожным пробам (Манту, Диаскин) в целях скринингового обследования детей на наличие туберкулезной инфекции;
как часть комплексной оценки риска наличия латентной туберкулезной инфекции (в том числе у вакцинированных БЦЖ или получавших БЦЖ-терапию);
для диагностики активной туберкулезной инфекции в совокупности с оценками риска, клиническими, рентгенологическими и другими лабораторными показателями (в качестве дополнительного метода обследования).

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения

В ответе указывается количество спотов (специфически сенсибилизированных Т-лимфоцитов) после инкубации по антигенам А (ESAT-6) и B (CFP-10). Приводится общая оценка результата теста в качественной форме.

Форма представления результата

Возможные формы заключения: «положительный», «отрицательный», «сомнительный».

Референсные значения

Интерпретация по количеству спотов:

≤ 4 – отрицательный;

5-7 – сомнительный;

≥ 8 – положительный.

Трактовка результатов исследования «T-SPOT.TB – иммунодиагностика туберкулезной инфекции, тест высвобождения гамма-интерферона»

Положительный

Образец содержит эффекторные Т-клетки, реактивные (специфически сенсибилизированные) к M. tuberculosis.

Отрицательный

Образец не содержит эффекторных Т-клеток, реактивных (специфически сенсибилизированных) к M. tuberculosis в значимой концентрации.

Сомнительный

Получен пограничный результат. Целесообразно провести повторное исследование через 1-2 месяца. При повторном получении пограничного результата для уточнения статуса пациента по ТВ инфекции следует использовать другие методы обследования и/или данные эпиданамнеза.

Для использования в целях установления диагноза или исключения туберкулеза, а также для оценки вероятности наличия латентной туберкулезной инфекции при интерпретации результатов T-SPOT.TB необходимо принимать во внимание весь комплекс эпидемиологических, анамнестических и клинических данных и результаты других проведенных диагностических исследований.

Примечание. Отрицательный результат не исключает возможности экспозиции к M. tuberculosis или текущей инфекции. При получении отрицательного результата T-SPOT.TB теста лицам, имевшим недавний контакт с инфицированными и отрицательный результат T-SPOT.TB теста, а также при наличии значимых клинических признаков возможной инфекции следует повторить тестирование через шесть недель. По оценкам, приведенным производителем, чувствительность метода при исследовании лиц с подтвержденным культуральным методом туберкулезом составила 95,6%.

Положительный результат не позволяет различить латентную инфекцию и активное заболевание. Для подтверждения активной формы туберкулеза следует применить другие тесты (ПЦР или культуральное исследование мокроты, рентгенографию грудной клетки). Хотя применяемые в данном тесте антигены отсутствуют в вакцине БЦЖ и у большинства других микобактерий, ложноположительный результат может отмечаться у лиц с инфекцией M. kansasii, M. szulgai, M. gordonae или M. marinum. При подозрении на такие инфекции могут потребоваться альтернативные тесты. Применение T-SPOT.TB теста не оценивали у лиц, получавших более одного месяца противотуберкулезную терапию. По оценкам, приведенным производителем, специфичность метода в группе лиц с низким риском туберкулеза составила 97,1%.