Определение различных популяций лимфоцитов, основные+определение маркеров активации (CD-типирование методом проточной цитометрии)

Описание

Метод определения Субпопуляции лимфоцитов – иммунофенотипирование (проточная цитометрия).

Исследуемый материал Цельная кровь (с ЭДТА)

Оценка состояния различных звеньев иммунитета, используемая в диагностике первичных и вторичных иммунодефицитов, аутоиммунных, лимфопролиферативных, инфекционных, гематологических заболеваний.

В состав профиля входят следующие показатели:

Базофилы
B-лимфоциты (CD3-19+), %
B-лимфоциты (CD3-19+)
T-лимфоц. (CD3+25+), %
T-лимфоц. (CD3+25+)
T-лимф. (CD3+19-), %
T-лимф. (CD3+19-)
T- хелперы (CD3+4+), %
CD4/CD8 (иммунорег.индекс)
T-хелперы (CD3+4+)
T- цитотокс. (CD3+8+), %
T-цитотокс. (CD3+8+)
Эозинофилы
Т-лимф.(CD3+HLA DR+), %
Т-лимф.(CD3+HLA DR+)
Лимфоциты, %
Лимфоциты
Моноциты, %
Моноциты
Нейтрофилы (общ.число)
NK-лимф.(CD3-16+56+), %
NK-лимф.(CD16+56+11b+), %
NK-лимф.(CD16+56+11b+)
NK-лимф.(CD3-16+56+)
T-NK-лимф.(CD3+16+56+), %
T-NK-лимф.(CD3+16+56+)
Лейкоциты

Основные субпопуляции лимфоцитов:

Т-лимфоциты – лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе (отсюда их название). Они контролируют работу В-лимфоцитов, ответственных за образование антител, т. е. за гуморальный иммунный ответ. Т-хелперы, Th (от англ. to help – помогать) – разновидность Т-лимфоцитов, несут на своей поверхности структуры, способствующие распознаванию антигенов, презентированных вспомогательными клетками, участвуют в регуляции иммунного ответа, вырабатывая различные цитокины. Цитотоксические Т-клетки - распознают фрагменты антигена, на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в области контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней.

В-лимфоциты (от лат. «bursa» - сумка по названию сумки Фабрициуса, в которой созревают эти лимфоциты у птиц) проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты отвечают делением и дифференциацией в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет.

ЕК-клетки (естественные клетки-киллеры) или натуральные киллеры-клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически изменённым клеткам-мишеням, которые не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам. Т-ЕК-клетки (ЕКТ) – клетки с естественной неиммунной киллерной активностью, имеющие признаки Т-лимфоцитов.

Активированные лимфоциты.

HLA-DR – один из антигенов MHC класса II (major histocompatibility complex - главный комплекс гистосовместимости), участвующих в презентации потенциально чужеродных антигенов, что необходимо для формирования адекватного иммунного ответа. При иммунофенотипировании может быть использован в качестве маркёра активированных клеток. CD3+HLA-DR+ - клетки, представляющие собой зрелые активированные Т-лимфоциты человека. CD3-HLA-DR+ - активированные клетки, не относящиеся к Т-лимфоцитам (В-лимфоциты и активированные ЕК).

Способность лимфоцитов к активации.

Способность лимфоцитов к активации в данном тесте оценивают по содержанию лимфоцитов, экспрессирующих CD69 в ответ на инкубацию в присутствии ФГА (митоген растительного происхождения). CD69 (другие названия - activation inducer molecule, AIM; early activation antigen, EA-1) – ранний маркёр активации, трансмембранный белок типа I. Этот белок вовлечен в ранние механизмы активации Т-клеток, ЕК-клеток, В-клеток, моноцитов и тромбоцитов.

Фагоцитарная активность лейкоцитов.

Данные по фагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов (относительное содержание клеток, фагоцитировавших добавленные к пробе при инкубации меченые флюоресцентной меткой бактерии) позволяют оценить резервные возможности этих клеток по поглощению и перевариванию чужеродных агентов.

Циркулирующие иммунные комплексы общие (ЦИК)

Одновременное присутствие высоких концентраций антигенов и их специфических антител может вести к образованию циркулирующих иммунных комплексов. Иммунные комплексы могут выходить из кровотока в мелких сосудах и откладываться в тканях, например, в гломерулах почек, в лёгких, коже, суставах, стенке сосудов. ЦИК обладают способностью связывать и активировать комплемент, что ведёт к повреждению ткани. Повышение уровня ЦИК может наблюдаться при аутоиммунных заболеваниях, хронических инфекционных заболеваниях, при которых постоянная продукция антигена инфекционным агентом сочетается с иммунным ответом на него (хронические гепатиты). Клинически это часто проявляется гломерулонефритами, артритами, нейропатиями. Несмотря на непосредственную роль в патогенезе некоторых заболеваний, определение ЦИК не всегда информативно, поскольку количество иммунных комплексов, отложившихся в тканях более важно, чем количество комплексов, циркулирующих в крови. Исследование ЦИК может быть недостаточно чувствительным и специфичным в диагностике болезней, вызываемых иммунными комплексами, и должно дополняться исследованием эффектов ЦИК на функцию органов (например, концентрация креатинина и анализ мочи), а также определением С3 С4 компонентов комплемента (см. тест № 193), количество которых снижается вследствие усиленного потребления.

Иммуноглобулины. См. информацию.к тестам Иммуноглобулины IgG, IgA, IgM, - №№ 45, 46, 47.

Данные иммунологического исследования интерпретирует врач-иммунолог в комплексе со всеми клинико-анамнестическими данными конкретного пациента. При оценке иммунного статуса пациента результаты исследования оценивают с точки зрения природы и стадии патологического процесса, сопутствующих заболеваний, приёма лекарственных препаратов и пр. При этом важны не только абсолютные значения отдельных показателей, но и их соотношение и динамика показателей. Изменения иммунологических показателей могут быть проявлением нормальной реакции организма на воздействие физиологических или патологических факторов (с различной картиной сдвигов на разных стадиях заболевания), отражать чрезмерную активацию, истощение иммунной системы, характеризовать врождённый или приобретённый дефект отдельных звеньев иммунной системы.

Литература

Зурочка А.В., Хайдуков С.В. и др. - Проточная цитометрия в медицине и биологии. – Екатеринбург: РИО УрО РАН, 2013. – 552 с.
Клиническая иммунология и аллергология / Ред. Лолор-младший Г., Фишер Т, Д. Адельман Д../: Пер. с англ. - М.: Практика, 2000. - 806 с.
Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. Том 2./Ред. Долгов В.В., Меньшиков В.В./ – М., ГЭОТАР-Медиа, 2012 – 808 с.
Практическое руководство по детским болезням. Том 8 Иммунология детского возраста. /Ред. А.Ю.Щербина, Е.Д.Пашанов/ - Москва: МЕДПРАКТИКА, 2006 - 432 с.
Ройт А., Бростофф Д., Дейл Д. Иммунология. - М.: Мир, 2000 — 592 с
Ярилин А. А. Иммунология. – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010 - 752 с.
Leach М., Drummond М., Doig A. Practical Flow Cytometry in Haematology Diagnosis Hardcover. – WILEY-BLACKWELL, 2013.
Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B. – USA: W.B Sounders Company, 2006 - 1798 p.

Подготовка

Строго натощак (в период с 7.00 до 11.00) после ночного периода голодания от 8 до 14 часов.

Накануне исследования необходимо исключить повышенные психоэмоциональные и физические нагрузки (спортивные тренировки), приём алкоголя, за час до исследования – курение.

Показания к назначению

Рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением.
Подозрение на генетически обусловленный или приобретённый иммунодефицит.
Аутоиммунные заболевания.
Аллергические заболевания.
Подозрение на синдром приобретённого иммунодефицита (СПИД).
Онкологические заболевания.
Обследование реципиентов до и после трансплантации органов.
Обследование пациентов перед серьёзными оперативными вмешательствами.
Осложнённое течение послеоперационного периода.
Контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Данные иммунологического исследования интерпретирует врач в комплексе со всеми клинико-анамнестическими данными конкретного пациента. При оценке иммунного статуса пациента результаты исследования оценивают с точки зрения природы и стадии патологического процесса, сопутствующих заболеваний, приёма лекарственных препаратов и пр. При этом важны не только абсолютные значения отдельных показателей, но и их соотношение и динамика показателей.

Название теста	Пол	Возраст	Референсные значения	Единицы измерения
Базофилы	Мужской и Женский	1 день - 120 лет	0,0 - 1,0	%
В-лимфоциты (CD3-19+),%	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	11 - 45	%
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	21 - 28
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	21 - 28
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	7 - 17
В-лимфоциты (CD3-19+)	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	387 - 2137	кл/мкл
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	740 - 1330
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	700 - 1300
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	7 - 17
Т-лимфоц. (CD3+25+), %	Мужской и Женский	2 дня - 12 меясцев	7 - 18	%
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	7 - 18
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	7 - 18
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	7 - 18
Т-лимфоц. (CD3+25+)	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	60 - 400	кл/мкл
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	60 - 400
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	60 - 400
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	60 - 400
Т-лимф. (CD3+19-), %	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	55 - 82	%
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	62 - 69
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	66 - 76
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	61 - 85
Т-лимф. (CD3+19-)	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	1614 - 3577	кл/мкл
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	1820 - 3010
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	1400 - 2000
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	946 - 2079
Т-хелперы (CD3+4+),%	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	35 - 55	%
CD4/CD8 (иммунорег. индекс)	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	1,8 - 2,2	у.е.
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	1,0 - 2,0
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	1,0 - 2,0
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	1,8 - 2,2
Т-хелперы (CD3+4+)	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	576 - 1336	кл/мкл
Т-цитокс. (CD3+8+),%	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	8 - 31	%
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	25 - 32
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	27 - 35
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	19 - 35
Т-цитокс. (CD3+8+)	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	259 - 1470	кл/мкл
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	810 - 1520
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	600 - 900
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	372 - 974
Эозинофилы	Мужской и Женский	1 день - 15 дней	1,0 - 6,0	%


	Мужской и Женский	15 дней - 12 месяцев	1,0 - 5,0
	Мужской и Женский	12 месяцев - 2 года	1,0 - 7,0
Т-лимф. (CD3+HLA DR+), %	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	1 - 6	%
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	1 - 6
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	1 - 6
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	1 - 6
Т-лимф. (CD3+HLA DR+)	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	7 - 163	кл/мкл
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	7 - 163
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	7 - 163
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	7 - 163
Лимфоциты, %	Мужской и Женский	1 день - 15 дней	22,0 - 55,0	%
	Мужской и Женский	15 дней - 12 месяцев	45,0 - 70,0
	Мужской и Женский	12 месяцев - 2 года	37,0 - 60,0
	Мужской и Женский	2 года - 5 лет	33,0 - 55,0
	Мужской и Женский	5 лет - 9 лет	30,0 - 50,0
	Мужской и Женский	9 лет - 12 лет	30,0 - 46,0
	Мужской и Женский	12 лет - 15 лет	30,0 - 45,0
	Мужской и Женский	15 лет - 120 лет	19,0 - 37,0
Лимфоциты	Мужской и Женский	1 день - 2 дня	1,60 - 7,40	10^9/л
	Мужской и Женский	2 дня - 5 дней	1,60 - 6,0
	Мужской и Женский	5 дней - 28 дней	2,80 - 9,00
	Мужской и Женский	28 дней - 6 месяцев	4,00 - 13,50
	Мужской и Женский	6 месяцев - 12 месяцев	4,00 - 10,50
	Мужской и Женский	12 месяцев - 2 года	3,00 - 9,50
	Мужской и Женский	2 года - 4 года	2,00 - 8,00
	Мужской и Женский	4 года - 6 лет	1,50 - 7,00
	Мужской и Женский	6 лет - 10 лет	1,50 - 6,50
	Мужской и Женский	10 лет - 21 год	1,00 - 4,80
	Женский	21 год - 120 лет	1,18 - 3,74
	Мужской	21 год - 120 лет	1,32 - 3,57
Моноциты, %	Мужской и Женский	1 день - 15 дней	5,0 - 15,0	%
	Мужской и Женский	15 дней- 12 месяцев	4,0 - 10,0
	Мужской и Женский	12 месяцев - 2 года	3,0 - 10,0
	Мужской и Женский	2 года - 15 лет	3,0 - 9,0
	Мужской и Женский	15 лет - 120 лет	3,0 - 11,0
Моноциты	Мужской и Женский	1 день - 2 дня	0,00 - 2,00	10^9/л
	Мужской и Женский	2 дня - 28 дней	0,00 - 1,70
	Мужской и Женский	28 дней - 6 месяцев	0,00 - 1,17
	Мужской и Женский	6 месяцев - 12 месяцев	0,00 - 1,15
	Мужской и Женский	12 месяцев - 2 года	0,00 - 1,00
	Мужской и Женский	2 года - 21 год	0,00 - 0,80
	Мужской и Женский	21 год - 120 лет	0,20 - 0,95
Нейтрофилы (общ.число)	Мужской и Женский	0 дней - 15 дней	31,0 - 56,0	%
	Мужской и Женский	15 дней - 12 месяцев	17,0 - 51,0
	Мужской и Женский	12 месяцев - 2 года	29,0 - 54,0
	Мужской и Женский	2 года - 5 лет	33,0 - 61,0
	Мужской и Женский	5 лет - 7 лет	39,0 - 64,0
	Мужской и Женский	7 лет - 9 лет	42,0 - 66,0
	Мужской и Женский	9 лет - 11 лет	44,0 - 66,0
	Мужской и Женский	11 лет - 15 лет	46,0 - 66,0
	Мужской и Женский	15 лет - 120 лет	48,0 - 78,0
NK-лимф. (CD3-16+56+), %	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	9 - 21	%
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	8 - 15
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	8 - 15
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	9 - 21
NK-лимф. (CD3-16+56+)	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	123 - 369	кл/мкл
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	210 - 640
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	200 - 600
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	123 - 369
T-NK-лимф. (CD3+16+56+), %	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	1 - 6	%
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	1 - 6
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	1 - 6
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	1 - 6
T-NK-лимф. (CD3+16+56+)	Мужской и Женский	2 дня - 12 месяцев	7-165	кл/мкл
	Мужской и Женский	12 месяцев - 6 лет	7-165
	Мужской и Женский	6 лет - 17 лет	7-165
	Мужской и Женский	17 лет - 120 лет	7-165
Лейкоциты	Мужской и Женский	1 день - 12 месяцев	6,00 - 17,50	10^9/л
	Мужской и Женский	12 месяцев - 2 года	6,00 - 17,00
	Мужской и Женский	2 года - 4 года	5,50 - 15,50
	Мужской и Женский	4 года - 6 лет	5,00 - 14,50
	Мужской и Женский	6 лет - 10 лет	4,50 - 13,50
	Мужской и Женский	10 лет - 16 лет	4,50 - 13,00
	Мужской и Женский	16 лет - 120 лет	4,50 - 11,0

Литература

Что еще заказывают с этим анализом