Метод определения
Исследование с использованием разведённого яда гадюки Рассела (dRVTT), скрининговый и подтверждающий тест. Автоматический анализатор свертывания.
Исследуемый материал
Плазма (цитрат)
Синонимы: Аутоантитела (IgG) против фосфолипидов;
Lupus anticoagulant panel; Lupus inhibitor; LA sensitive PTT; PTT-LA; Dilute Russell viper venom test; DRVVT; Modified Russell viper venom tes; MRVVT.
Краткая характеристика теста «Волчаночный антикоагулянт»
Волчаночный антикоагулянт (ВА) – собирательное название для популяции антифосфолипидных антител, которые вызывают удлинение времени свертывания в фосфолипид-зависимых коагуляционных тестах. Происхождение названия «волчаночный антикоагулянт» исторически связано с тем, что впервые этот феномен был описан при обследовании пациента с системной красной волчанкой (СКВ). Парадоксально, в отличие от антикоагулянтного эффекта и удлинения времени свертывания в лабораторных тестах (in vitro), присутствие волчаночного антикоагулянта в условиях организма (in vivo) ассоциировано с риском состояний гиперкоагуляции и тромбозов.
В соответствии с текущими представлениями антифосфолипидные антитела представляют собой гетерогенную группу аутоиммунных антител, которые способны взаимодействовать не только с фосфолипидами, но главным образом с фосфолипид-связывающими белками и их комплексами с фосфолипидами. Наиболее часто мишенью антифосфолипидных антител при АФС является белок бета-2-гликопротеин 1. Помимо него фосфолипид-связывающими белками являются протромбин, протеин С, аннексин V, тромбомодулин, кининогены, антитромбин III и другие. Одним из важных видов фосфолипидов, с которыми связываются эти белки, является фосфатидил-серин. Механизмы патогенного действия и индукции тромбоза антифосфолипидными антителами изучены недостаточно.
Предположительно они могут включать интерференцию с эндогенными антикоагулянтами (в том числе ингибирование пути протеина С, нарушение антикоагулянтной защиты, связанной с аннексином V, ингибирование антитромбина), взаимодействие с эндотелиальными клетками, которое приводит к выделению тканевого фактора и экспрессии молекул адгезии, связывание и активацию тромбоцитов, активацию системы комплемента.
С какой целью определяют волчаночный антикоагулянт в крови
Исследование волчаночного антикоагулянта используют в диагностике антифосфолипидного синдрома (АФС). Это комплекс симптомов, который включает повторные сосудистые тромбозы или патологию беременности (чаще синдром потери плода) и характеризуется присутствием антифосфолипидных антител. Диагноз АФС ставится при сочетании наличия одного клинического критерия (подтвержденные эпизоды сосудистого тромбоза или определенные виды патологии беременности в анамнезе) и как минимум одного лабораторного критерия (положительный результат в любом из трех видов исследований: 1) антитела к кардиолипину; 2) волчаночный антикоагулянт; 3) антитела к бета-2-гликопротеину 1, перепроверенный по крайней мере два раза в течение 12 недель). Выявляемые в этих тестах антифосфолипидные антитела частично перекрываются по своей специфичности. Из указанных лабораторных маркеров, персистирующий ВА проявляет наиболее тесную связь с риском тромбозов при АФС. ВА может быть обусловлен присутствием антител к бета-2-гликопротеину 1 или антител к протромбину, но часто выявляется и в отсутствие таких антител.
Тест с использованием разведенного яда гадюки Рассела, который активирует непосредственно V и X факторы свертывания, независимо от активации VII, VIII, IX, XI, и XII факторов (таким образом результат не зависит от влияния их дефицита или ингибирования), является одним из рекомендуемых вариантов исследования ВА.
Скрининговый тест проводится при использовании ограниченной концентрации фосфолипидов в реагенте для повышения чувствительности к ВА. Подтверждающее исследование проводится при получении положительного результата в скрининге, тем же методом, но на фоне избытка фосфолипидов. Если удлиненное время свертывания в скрининговом тесте корректируется избытком фосфолипидов в подтверждающем тесте, это подтверждает фосфолипид-зависимый эффект и указывает на высокую вероятность присутствия ВА.
Следует учитывать, что выполнение исследования ВА на фоне терапии антикоагулянтами типа варфарина, прямых ингибиторов тромбина (Прадакса и пр.), прямых ингибиторов Xa фактора (Ксарелто и пр.) или избытка гепарина может приводить к искажению результатов (см. также раздел «Подготовка к исследованиям»).
Литература
Основная литература
- Алексеева Е.И. с соавт. Системная красная волчанка: клинические рекомендации. Часть 1. 1. Вопросы современной педиатрии. 2018; 17 (1): 19–37
- Клинические рекомендации по лечению антифосфолипидного синдрома. Ассоциация ревматологов России. М., 2013
- Кобилянская В. А. Определение волчаночного антикоагулянта у пациентов на фоне приема ривароксабана. Вестник гематологии, 2018, 15, 1, с.47-48
- Flieder T. et al. Interference of DOACs in different DRVVT assays for diagnosis of lupus anticoagulants. Thrombosis Research, 2018, 165, 101–106
- Lim W. Thrombotic Risk in the Antiphospholipid Syndrome. Semin Thromb Hemost 2014;40, pp.741–746.
- Molhoek J.E. et al The Lupus Anticoagulant Paradox. Semin Thromb Hemost. 2018, 44 (5), pp. 445-452.
- Moore G.W. Recent Guidelines and Recommendations for Laboratory Detection of Lupus Anticoagulants. Semin Thromb Hemost. 2014; 40 (2), pp. 163-171.
- Negrini S. et al. The antiphospholipid syndrome: from pathophysiology to treatment. Clin Exp Med. 2017 17 (3), pp. 257-267.
- CLSI H60-A Laboratory Testing for the Lupus Anticoagulant; Approved Guideline, 04/2014
- Материалы фирмы – производителя реагентов.