ТиграТест® ТВ – иммунодиагностика туберкулезной инфекции, тест высвобождения гамма-интерферона (TigraTest® TВ – immunodiagnosis of tuberculosis infection, gamma interferon release test)

Синонимы: IGRA-тест (Interferon Gamma Release Assay) для in vitro диагностики туберкулезной инфекции; Анализ крови на туберкулез.

IGRA test (Interferon Gamma Release Assay) for in vitro diagnosis of tuberculosis infection; Blood test for tuberculosis.

Краткое описание исследования «ТиграТест® ТВ – иммунодиагностика туберкулезной инфекции, тест высвобождения гамма-интерферона»

Туберкулез – инфекционное хроническое заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex).

Варианты развития ситуации после проникновения возбудителя туберкулеза в организм человека следующие:

• полная элиминация (удаление) микобактерий туберкулеза из организма;
• развитие первичного туберкулеза (при быстром росте и размножении бактерий);

· латентная инфекция (микобактерии персистируют в организме в неактивном состоянии, обуславливая стойкий иммунный ответ на антигены возбудителя при отсутствии клинических проявлений активной формы заболевания).

Это состояние у многих инфицированных может сохраняться на протяжении всей жизни. Такие люди не распространяют инфекцию, но у части пациентов латентная инфекция в течение жизни может перейти в клинически манифестированное заболевание. Риск прогрессии латентной инфекции в активное заболевание увеличивается при ослаблении иммунной системы.

Активная туберкулезная инфекция диагностируется по:

• комплексу клинических симптомов;
• медицинской истории пациента;
• данным рентгенологических исследований;
• результатам прямых методов лабораторного выявления Mycobacterium tuberculosis в мокроте или мазках (микробиологические культуральные методы, выявление ДНК возбудителя с применением ПЦР (см. тест № 341 для соответствующей локализации).

Диагностика латентной инфекции затруднена отсутствием клинических и рентгенологических признаков заболевания, а также отсутствием возбудителя в пробах доступного биоматериала. Однако ее выявление важно для определения людей, нуждающихся в контроле и превентивной терапии.

В настоящее время существуют два подхода к выявлению вероятной латентной инфекции:

• in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
• in vitro: оценка ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).

Оба подхода основаны на оценке характера иммунной реакции человека на антигены возбудителя, т. е. не являются методами прямого выявления инфекционного агента.

В связи с достаточно высокой распространенностью туберкулеза в нашей стране, Министерство здравоохранения РФ рекомендует ежегодно проводить скрининговое обследование детей в возрасте от 1 года до 17 лет на наличие туберкулезной инфекции (в том числе при поступлении в детские сады и школы). Профилактическое скрининговое обследование обычно проводят с использованием внутрикожных проб. При наличии определенных противопоказаний или информированном отказе родителей от применения внутрикожных проб ребенку допускается назначение альтернативных методов обследования.

Разработаны диагностические тесты in vitro или IGRA-тесты (Interferon Gamma Release Assay), основанные на высвобождении ИФН-у под воздействием специфических туберкулезных антигенов CFP-10/ESAT-6 и др.

К ним относятся:

• Наборы реагентов для in vitro диагностики туберкулезной инфекции "ТиграТест® ТВ" и аналогичный Т-СПОТ.ТБ (T-SPOT®.TB см. тест № 1321ВЗР и № 1321ДЕТ). Это тесты на высвобождение интерферона гамма in vitro для определения в крови Т-лимфоцитов, специфически отвечающих на антигены ESAT-6 и CFP-10 комплекса Mycobacterium tuberculosis, методом IGRA ELISPOT.
• Набор реагентов для качественного определения интерферона-гамма (ИФН-у) методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) в плазме крови человека, выделенной из гепаринизированной цельной крови человека для идентификации in vitro ответа на рекомбинантный ТВ антиген, ассоциированный с инфекцией Mycobacterium tuberculosis (TB-Feron IGRA см. тест № 1598TB);

Пробы на высвобождение ИФН-у имеют высокое прогностическое значение. Люди с положительным результатом заболевают в течение двух последующих лет гораздо чаще, чем туберкулиноположительные. Это является аргументом для первоочередного проведения у людей с положительным результатом данных проб превентивной химиотерапии.

Проведение этих тестов in vitro не предполагает введение лекарственных препаратов в организм, что полностью исключает возможность нежелательных явлений в виде аллергических реакций у людей, имеющих отягощенный аллергологический анамнез, и затруднения при интерпретации результатов теста у людей с кожными проявлениями аллергических заболеваний и состояний.

ТиграТест® ТВ допускается к использованию клиническими рекомендациями МЗ РФ и Российского общества фтизиатров по выявлению и диагностике туберкулеза у детей (2024). В соответствии с рекомендациями, при проведении скринингового обследования детей отрицательный результат ТиграТест® ТВ при отсутствии клинических симптомов заболевания (респираторного и интоксикационного характера, других локальных патологических проявлений) позволяет врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза.

К достоинствам этого метода можно отнести то, что подбор специфических антигенов исключает:

• ложноположительные реакции, связанные с предшествующей вакцинацией БЦЖ (такие антигены отсутствуют на линиях Bacillus Calmette-Guerin, BCG)
• перекрестные реакции с большинством нетуберкулезных микобактерий окружающей среды (за исключением M. kansasii, M. szulgai и M. marinum).

Напротив, люди, инфицированные микобактериями туберкулезного комплекса (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M. microti, M. canetti) обычно имеют в крови Т-клетки, распознающие эти и другие антигены таких бактерий.

ТиграТест® ТВ не позволяет различать латентную инфекцию и активное заболевание.

Следует учитывать, что чувствительность и специфичность подобных методов в целях скрининга туберкулезной инфекции не достигают 100%. Поэтому такие тесты следует применять с учетом общей оценки индивидуального риска в комплексе со стандартными методами диагностики.

С какой целью выполняют исследование

Выявление в крови клеток (Т–лимфоцитов), специфически отвечающих на антигены ESAT-6 и CFP-10 комплекса Mycobacterium tuberculosis для выявления сенсибилизации организма (инфицирования) к микобактериям туберкулеза.

Что может повлиять на результат исследования

См. раздел Интерпретация результатов.

Литература

1. Клинические рекомендации. Туберкулез у детей. – 2024.
2. Инструкция по применению медицинского изделия для диагностики in vitro «ТиграТест® ТВ».

Правила подготовки к исследованию

Предварительно уточнить допустимое время, день недели и медицинский офис, где можно сдать пробу крови для проведения данного исследования.

Специальной подготовки не требуется.

Перед проведением ТиграТест® ТВ проконсультируйтесь с лечащим врачом.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Единицы измерения

В ответе указывается количество пятен (специфически сенсибилизированных Т-лимфоцитов) после инкубации по антигенам 1 (ESAT-6) и 2 (CFP-10). Приводится общая оценка результата теста в качественной форме.

Референсные значения

Интерпретация по количеству пятен с панелью антигенов 1 и/или с панелью антигенов 2:

≤ 5 – отрицательный;

6-7 – сомнительный;

≥ 8 – положительный.

Форма представления результата

Возможные формы заключения: «положительный», «отрицательный», «сомнительный».

Трактовка результатов исследования «ТиграТест® ТВ – иммунодиагностика туберкулезной инфекции, тест высвобождения гамма-интерферона»

Положительный

Образец содержит эффекторные Т-клетки, реактивные (специфически сенсибилизированные) к M. tuberculosis.

Отрицательный

Образец не содержит эффекторных Т-клеток, реактивных (специфически сенсибилизированных) к M. tuberculosis в значимой концентрации.

Сомнительный

Получен пограничный результат. Целесообразно провести повторное исследование через 1-2 месяца. При повторном получении пограничного результата для уточнения статуса пациента по ТВ-инфекции следует использовать другие методы обследования и/или данные эпиданамнеза.

Для использования в целях постановки диагноза или исключения туберкулеза, а также для оценки вероятности наличия латентной туберкулезной инфекции при интерпретации результатов ТиграТест® ТВ необходимо принимать во внимание весь комплекс эпидемиологических, анамнестических и клинических данных и результаты других проведенных диагностических исследований.

Примечание

Отрицательный результат не исключает возможности экспозиции к M. tuberculosis или текущей инфекции. При получении отрицательного результата ТиграТест® ТВ теста людям, имевшим недавний контакт с инфицированными, а также при наличии значимых клинических признаков возможной инфекции следует повторить тестирование через шесть недель.

По оценкам, приведенным производителем, диагностическая чувствительность метода составляет 97,4%, диагностическая специфичность – 97,6%.

Положительный результат не позволяет различить латентную инфекцию и активное заболевание. Для подтверждения активной формы туберкулеза следует применить другие тесты (ПЦР или культуральное исследование мокроты, рентгенографию грудной клетки).

Ложноотрицательный результат может быть:

• при тяжелых иммунодепрессивных состояниях, связанных с функциональным истощением Т-лимфоцитов, в том числе при ВИЧ-инфекции;
• у людей, принимающих преднизолон курсом более 1 месяца, с максимальной его концентрацией в крови свыше 1,24 мкг/мл;
• у пожилых людей старше 60 лет;
• у некоторых пациентов, имеющих сахарный диабет, заболевания почек;
• у людей с внелегочной формой туберкулеза (туберкулезный спондилит, туберкулез ЦНС).

Ложноположительный результат может быть:

• у пациентов, инфицированных некоторыми видами нетуберкулезных микобактерий, включая M. kansasii, M. marinum, M. szulgai, M. gordonae, M. xenopi вследствие наличия белков CFP-10 и ESAT-6 у этих видов.

Вышеперечисленные ограничения учитывают при оценке результатов путем тщательного сбора данных анамнеза.