Вирус гриппа А/B, качественное определение РНК (Influenza virus A/B, quality, RNA)

Метод определения ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Исследуемый материал Мазок со слизистой носоглотки и/или ротоглотки

Выявление РНК вируса гриппа А/В в мазке эпителиальных клеток носо- и ротоглотки проводят в целях дифференциальной диагностики гриппа, гриппоподобных состояний, острых респираторных заболеваний, сопровождаемых повышением температуры тела. Выявление РНК вируса гриппа А/В в мазке эпителиальных клеток носо- и ротоглотки проводят в целях дифференциальной диагностики гриппа, гриппоподобных состояний, острых респираторных заболеваний, сопровождаемых повышением температуры тела.

Синонимы: Исследование мазка из носа и ротоглотки на РНК вируса гриппа А и В. Influenza type A and type B; Influenza A/B RNA; Flu A/B RNA PCR.

Краткое описание исследования «Вирус гриппа А/B, качественное определение РНК»

Грипп – острая респираторная вирусная инфекция, передаваемая воздушно-капельным путем. Возбудители гриппа – РНК-содержащие вирусы, относящиеся к семейству Orthomyxoviridae, в котором выделяют три рода: Influenza A virus, Influenza B virus, Influenza C virus.

Вирусы гриппа А и В ежегодно вызывают эпидемии большей или меньшей интенсивности практически во всех странах мира. Вирусы гриппа А широко распространены в природе, их выделяют у большинства зверей и птиц, в связи с чем они имеют высокий пандемический потенциал, так как способны преодолевать межвидовый барьер. Основной причиной возникновения эпидемий и пандемий гриппа является высокая вариабельность вируса вследствие изменений в его геноме. Это касается фрагментов, кодирующих поверхностные антигены вирусов типов А и В и определяющих их специфичность.

Симптомы и признаки гриппа

Инкубационный период гриппа составляет от 1 до 4 дней, в среднем около 48 часов. В легких случаях многие симптомы похожи на симптомы простуды (например, боль в горле, ринорея), также может возникнуть легкий конъюнктивит.
Типичный грипп у взрослых характеризуется внезапным появлением озноба, лихорадки, прострации, кашля и генерализованных болей (особенно в спине и ногах). Сильная головная боль, часто со светобоязнью. Вначале респираторные симптомы могут быть легкими, с першением в горле, жжением за грудиной, непродуктивным кашлем и иногда насморком. Позже заболевание нижних дыхательных путей становится преобладающим; кашель может быть стойким, хриплым и продуктивным.
Могут возникать желудочно-кишечные симптомы, которые, по-видимому, чаще встречаются у пандемического штамма H1N1 2009 года. У детей может быть выраженная тошнота, рвота или боль в животе, а у младенцев может быть синдром, подобный сепсису.
Через 2-3 дня острые симптомы быстро проходят, хотя лихорадка может длиться до 5 дней. Кашель, слабость, потливость и утомляемость могут сохраняться в течение нескольких дней, а иногда и недель.
Большинство заболевших переносит грипп без осложнений, но эта инфекция способна вызывать серьезные осложнения, приводящие к тяжелому течению заболевания и даже жизнеугрожающиим состояниям, особенно у детей раннего возраста, пожилых взрослых, женщин во время беременности и в ранний послеродовый период, людей с хроническими легочными, сердечными заболеваниями, метаболическими расстройствами, нарушениями иммунитета, неврологическими и когнитивными расстройствами,.

Диагностика инфекции осуществляется комплексно, на основании анамнестических данных о контакте с больными гриппом и характерной клинической картины.

Подтверждение диагноза возможно с помощью лабораторных исследований, что целесообразно:

при наличии гриппоподобных проявлений, в эпидемический сезон роста заболеваемости острыми респираторными инфекциями - если это будет влиять на проводимую терапию;
неспецифические признаки инфекции верхних дыхательных путей у лиц групп высокого риска;
при тяжелом течении респираторных болезней.

В качестве лабораторных тестов, нацеленных на идентификацию возбудителя инфекции могут быть использованы следующие лабораторные исследования:

молекулярно-биологическое исследование мазков со слизистой оболочки носо- и ротоглотки на вирус гриппа (выявление РНК вируса гриппа методом ПЦР);
определение антигенов вирусов гриппа A и B в мазках со слизистой носа и ротоглотки методом иммунохроматографии или иммунофлюоросценции;
определение антител к антигенам вируса гриппа А/B в сыворотке крови методом ИФА.

Из них максимального уровня специфичности и чувствительности достигают тесты на основе ПЦР-ОТ (полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени, позволяющие обнаруживать в биологическом материале РНК возбудителя инфекции.

Антигенные тесты выявления вируса гриппа А+В недостаточно стандартизированы, их аналитические характеристики (чувствительность и специфичность) в целом несколько ниже, чем у ПЦР-методов.

Результаты определения антител методами ИФА, в связи с периодом появления антител, как правило, оцениваются ретроспективно. Вследствие поздней диагностики они не влияют на коррекцию терапии, но применимы в научных целях и для эпидемиологического надзора и контроля за гриппом.

Наиболее современным и рекомендуемым методом лабораторной диагностики гриппа является выявление РНК вируса методом ПЦР.

Аналитические показатели:

определяемый фрагмент – специфический участок нуклеиновой кислоты вирусов гриппа А (Influenza virus A) и гриппа В (Influenza virus B);

специфичность обнаружения – отсутствие неспецифических реакций в отношении других вирусных и бактериальных возбудителей ОРЗ. Аналитическая чувствительность:

вирус гриппа А (Influenza virus A) – 1×10^3 копий/мл исходного образца.

вирус гриппа В (Influenza virus В) – 1×10^3 копий/мл исходного образца.

Аналитическая специфичность

Перекрестных реакций с вирусами (парагрипп 1, 2, 3 и 4 типов, аденовирусы, бокавирусы, метапневмовирусы, респираторно-синцитиальные вирусы, риновирусы и коронавирусы hCoV NL63, hCoV OC43, hCoV 229E, hCoV HKU1, SARS-CoV-2) и микроорганизмов (Chlamydophila pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumophila, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, Staphylococcus spp, Streptococcus spp, Prevotella spp, Leptotrichia spp, Corynebacterium spp, Neisseria spp.) не обнаружено.

С какой целью выполняют исследование

Выявление РНК вирусов гриппа А+В в мазках слизистой носо- и ротоглотки проводят в целях дифференциальной диагностики гриппа, гриппоподобных состояний, острых респираторных заболеваний с повышением температуры тела.

Литература

В каких случаях проводят анализ «Вирус гриппа А/B, качественное определение РНК»:

дифференциальная диагностика вирусных респираторных инфекций - гриппоподобные состояния, респираторные инфекции верхних дыхательных путей, сопровождающиеся повышенной температурой, тошнотой, головными и мышечными болями, катаральными явлениями;
госпитализация больного по поводу ОРВИ (тяжелые и необычные формы);
заболевание людей с высоким риском неблагоприятного исхода гриппа и ОРВИ (с хроническими заболеваниями сердца, легких, метаболическим синдромом и пр., беременных);
обследования по показаниям с целью эпидемиологического надзора и анализом заболеваемости гриппом.

Трактовка результатов исследования «Вирус гриппа А/B, качественное определение РНК»

Обнаружено

В анализируемом образце биологического материала найден фрагмент РНК, специфичный для вируса гриппа А и/или В.

Не обнаружено

В анализируемом образце биологического материала не обнаружено фрагментов РНК, специфичных для вируса гриппа А/В, или концентрация РНК возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.

Единицы измерения:

Форма представления результатов

Результат выдается в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».